Termenul „microscopie” are rădăcini grecești. În traducere, înseamnă studiul obiectelor folosind instrumente de înaltă precizie. Recent, a devenit din ce în ce mai popular microscopie fluorescentă și electronică.
Rezoluţie
De regulă, este înțeles ca minimdistanța la care pot fi obiecte clar vizibile. Gradul de penetrare în lumea microscopică, capacitatea de a lua în considerare dimensiunea elementului investigat, vor depinde de rezoluția echipamentului. La mărire mare, limitele obiectelor se pot îmbina. În consecință, există anumite limite dincolo de care aproximarea elementelor este lipsită de sens.
Metoda microscopiei fluorescentei: mecanism
La conversia energiei pe care o absoarbesubstanță, în radiațiile vizibile, apare o strălucire. Se numește luminescență. Acest fenomen se datorează faptului că unele substanțe aflate sub influența luminii încep să emită raze cu o lungime de undă diferită (de obicei lungă). În plus, unele obiecte care au o anumită culoare sub iluminare normală își schimbă culoarea sub influența radiațiilor ultraviolete.
specificitate
Un obiect care nu poate fi văzut în ultravioletelumină, poate emite o strălucire strălucitoare dacă este tratată cu o substanță specială. În el, elementele strălucesc în diferite culori în întuneric. Puterea radiației este diferită, dar de obicei este mică. În acest sens, microscopia cu fluorescență este eficientă într-o cameră întunecată. Atunci când se utilizează acest tip de cercetare, obiectul este privit în lumina pe care el însuși o emite. Compoziția chimică a țesuturilor și celulelor va afecta calitatea studiului. Microscopia cu luminiscență este considerată într-o oarecare măsură un examen histochimic.
clasificare
Microscopie cu luminiscență poate fi primar sau secundar. În acest din urmă caz, obiectul este prelucrat cu compuși speciali care dau o strălucire. Primar microscopie fluorescentă se bazează pe capacitatea intrinsecă a elementului investigat de a emite lumină.
echipament
Microscopia fluorescentă se efectuează cufolosind o varietate de dispozitive. Iluminatorul acționează ca elementul lor principal. Este echipat cu o lampă UV. În plus, dispozitivele folosesc un set de filtre. În unele dispozitive, există destul de multe dintre ele în configurații diferite. În funcție de culoarea care este utilizată pentru a excita luminiscența - ultraviolete sau albastre, un filtru adecvat este plasat între sursa de lumină și obiectul studiat. Din moment ce strălucirea unui element microscopic este mai slabă din punct de vedere energetic decât lumina interesantă, va fi captată numai într-o singură condiție. Razele în exces care provin de la sursă trebuie tăiate de un filtru galben-verde. Este plasat pe ocularul instrumentului. Cel mai pronunțat efect de luminescență va fi atunci când filtrul întrerupe complet razele emanate de sursa de lumină.
În ce constă o instalație de lumină vizibilă?Conține o sursă de lumină strălucitoare și un microscop biologic. Un filtru albastru-violet este instalat între oglinda dispozitivului și lampă. Acesta poate fi FS-1, UFS-3 și așa mai departe. Filtrul galben se potrivește peste ocularul microscopului. Cu ajutorul lor, lumina albastru-violet cade asupra obiectului. De asemenea, excită luminescența. Dar această lumină poate interfera cu vederea strălucirii. Prin urmare, pe drumul spre ochi, este tăiat de un filtru galben. Instalarea iluminatului se face conform metodei Koehler, cu o singură excepție. Membrana condensatorului trebuie să fie complet deschisă. Este important să folosiți un ulei de imersie non-fluorescent atunci când faceți cercetări. Pentru a-și reduce propria strălucire, i se adaugă nitrobenzen (2-10 picături / 1 g).
Microscopie cu luminiscență: aplicații în microbiologie
Avantajele acestui tip de cercetare sunt:
- Capacitatea de a obține imagini color.
- Nivel ridicat de contrast al elementelor auto-emitente pe un fundal negru.
- Detectarea și localizarea anumitor tipuri de viruși și microbi.
- Capacitatea de a studia organismele vii transparente și opace.
- Studiul proceselor de viață în dinamica lor.
De asemenea, trebuie spus că microscopia cu luminiscență contribuie la dezvoltarea celor mai bune metode de histochimie și citochimie, diagnosticare expresă.
