Le terme «microscopie» a des racines grecques. Traduit, cela signifie l'étude d'objets à l'aide d'instruments de haute précision. Récemment, il est devenu de plus en plus populaire luminescence et microscopie électronique.
Résolution
En règle générale, il est compris comme le minimumla distance à laquelle les objets clairement visibles peuvent être. Le degré de pénétration dans le monde microscopique, la capacité à considérer la taille de l'élément étudié dépendra de la résolution de l'équipement. À fort grossissement, les limites des objets peuvent fusionner. En conséquence, il existe certaines limites au-delà desquelles l'approximation des éléments n'a pas de sens.
Méthode de microscopie à fluorescence: mécanisme
Lors de la conversion de l'énergie qu'il absorbesubstance, dans le rayonnement visible, une lueur se produit. Cela s'appelle la luminescence. Ce phénomène est dû au fait que certaines substances, lorsqu'elles sont exposées à la lumière, commencent à émettre des rayons avec une longueur d'onde différente (généralement longue). De plus, certains objets qui ont une certaine couleur sous un éclairage normal changent de couleur sous l'influence du rayonnement ultraviolet.
Détails
Un objet qui ne peut pas être vu à la lumière ultraviolettela lumière peut émettre un éclat brillant si elle est traitée avec une substance spéciale. Dans celui-ci, les éléments brillent de différentes couleurs dans l'obscurité. La force du rayonnement varie, mais elle est généralement faible. À cet égard, la microscopie à fluorescence est efficace dans une pièce sombre. Lors de l'utilisation de ce type de recherche, l'objet est vu dans la lumière qu'il émet lui-même. La composition chimique des tissus et des cellules affectera la qualité de l'étude. La microscopie à luminescence est considérée dans une certaine mesure comme un examen histochimique.
Classification
Microscopie à luminescence peut être primaire ou secondaire. Dans ce dernier cas, l'objet est traité avec des composés spéciaux qui donnent une lueur. Primaire microscopie à fluorescence est basé sur la capacité intrinsèque de l'élément étudié à émettre de la lumière.
Équipement
La microscopie à fluorescence est réalisée avecen utilisant une variété d'appareils. Leur élément principal est l'illuminateur. Il est équipé d'une lampe UV. De plus, les appareils utilisent un ensemble de filtres. Dans certains appareils, il y en a beaucoup dans différentes configurations. Selon la couleur utilisée pour exciter la luminescence - ultraviolet ou bleu, un filtre approprié est placé entre la source lumineuse et l'objet à étudier. Étant donné que la lueur d'un élément microscopique est énergétiquement plus faible que la lumière d'excitation, elle ne sera capturée que sous une seule condition. Les rayons excédentaires émanant de la source doivent être coupés par un filtre jaune-vert. Il est placé sur l'oculaire de l'instrument. L'effet de luminescence le plus prononcé sera lorsque le filtre coupe complètement les rayons émanant de la source lumineuse.
En quoi consiste une installation de lumière visible?Il contient une source de lumière vive et un microscope biologique. Un filtre bleu-violet est installé entre le miroir de l'appareil et la lampe. Cela peut être FS-1, UFS-3, etc. Le filtre jaune s'adapte sur l'oculaire du microscope. Avec leur aide, une lumière bleu-violet tombe sur l'objet. Il excite également la luminescence. Mais cette lumière peut interférer avec la vision de la lueur. Par conséquent, sur le chemin de l'œil, il est coupé par un filtre jaune. L'éclairage est installé selon la méthode Koehler, à une exception près. Le diaphragme du condenseur doit être complètement ouvert. Il est important d'utiliser une huile d'immersion non fluorescente lors des tests. Pour réduire sa propre lueur, du nitrobenzène y est ajouté (2-10 gouttes / 1 g).
Microscopie à luminescence: applications en microbiologie
Les avantages de ce type de recherche sont:
- La possibilité d'obtenir des images couleur.
- Niveau de contraste élevé des éléments auto-émetteurs sur fond noir.
- Détection et localisation de certains types de virus et de microbes.
- La capacité d'étudier les organismes vivants transparents et non transparents.
- Etude des processus de la vie dans leur dynamique.
Il faut aussi dire que la microscopie à luminescence contribue au développement des meilleures méthodes d'histochimie et de cytochimie, express diagnostics.
