Melkein kaikkien laboratoriodiagnoositartuntataudit perustuvat vasta-aineiden havaitsemiseen potilaan veressä, jotka tuotetaan patogeeniantigeeneille serologisten reaktioiden menetelmillä. He aloittivat lääketieteen käytännön yhdeksästoista luvun lopusta aina kahdennenkymmenennen vuosisadan alusta.
Tieteen kehitys on auttanut määrittämään antigeeninmikrobien rakenne ja niiden toksiinien kemialliset kaavat. Tämän ansiosta oli mahdollista luoda paitsi terapeuttisia, myös diagnostisia seerumeita. Ne saadaan tuomalla heikennettyjä taudinaiheuttajia laboratorioeläimille. Usean päivän altistumisen jälkeen kanien tai hiirten verestä valmistetaan valmisteita, joita käytetään mikrobien tai niiden toksiinien tunnistamiseen serologisten reaktioiden avulla.
Tällaisen reaktion ulkoinen esiintyminen riippuusen formuloinnin olosuhteet ja antigeenien tila potilaan veressä. Jos mikrobien hiukkaset ovat liukenemattomia, ne saostetaan, hajoutetaan, sidotaan tai immobilisoidaan seerumissa. Jos antigeenit ovat liukoisia, ilmenee neutraloitumis- tai saostumisilmiö.
Agglutinaatioreaktio (RA)
Serologinen aglutinaatiotesti onerittäin tarkka. Se on helppo suorittaa ja riittävän visuaalinen antigeenien läsnäolon määrittämiseksi nopeasti potilaan veren seerumissa. Sitä käytetään Vidal-reaktion (lavantauti- ja paratyfoidikuume diagnoosit) ja Weiglin (lavantauti-tyypin kuume) muotoiluun.
Se perustuu tiettyyn vuorovaikutukseen.ihmisen vasta-aineiden (tai agglutiniinien) ja mikrobisolujen (agglutenogeenit) välillä. Vuorovaikutuksensa jälkeen muodostuu hiukkasia, jotka saostuvat. Tämä on positiivinen merkki. Reaktion formulointiin voidaan käyttää eläviä tai tapettuja mikrobiaineita, sieniä, alkueläimiä, verisoluja ja somaattisia soluja.
Kemiallisesti reaktio on jaettu kahteen vaiheeseen:
- Spesifinen vasta-aineiden yhdiste (AT) antigeenien (AH) kanssa.
- Ei-spesifinen - AG-AT-konglomeraattien laskeuma, toisin sanoen agglutinaatin muodostuminen.
Epäsuora aglutinaatioreaktio (RPHA)
Tuotantoon käytetään kuorittua lammasta.vasta-aineilla tai antigeeneillä esikäsitellyn henkilön punasolut ja punasolut (se riippuu siitä, mitä laboratorion avustaja haluaa löytää). Joissakin tapauksissa ihmisen punasoluja hoidetaan immunoglobulineilla. Punasolujen serologisten reaktioiden katsotaan päättyneen, jos ne saostuvat putken pohjaan. Voit puhua positiivisesta reaktiosta, kun solut on järjestetty käännettynä sateenvarjona, joka miehittää koko pohjan. Negatiivinen reaktio lasketaan, jos punasolut asettuivat pylvääseen tai painikkeen muodossa pohjan keskelle.
Sademäärä (RP)
Seerumit reaktiolle saadaaneläinten, yleensä kanien, keinotekoinen infektio. Tätä menetelmää voidaan käyttää ehdottomasti minkä tahansa saostavan seerumin saamiseksi. Serologisten saostumisreaktioiden asettaminen on samanlainen vaikutusmekanismiltaan kuin agglutinaatioreaktiot. Seerumin sisältämät vasta-aineet yhdistyvät kolloidiliuoksessa olevien antigeenien kanssa muodostaen suuria proteiinimolekyylejä, jotka kerrostuvat koeputken pohjalle tai substraatille (geeli). Tätä menetelmää pidetään erittäin spesifisenä ja sillä voidaan havaita jopa vähäiset määrät ainetta.
Käytetään ruton, tularemian, pernaruton, aivokalvontulehduksen ja muiden sairauksien diagnosointiin. Lisäksi hän on mukana oikeuslääketieteellisissä lääketieteellisissä tutkimuksissa.
Geelien saostusreaktio
Eksotoksiinin antitoksiinin (PH) neutralointireaktio
Antitoksiset seerumit voivat neutraloidamikro-organismien tuottaman eksotoksiinin vaikutus. Tämä on näiden serologisten reaktioiden perusta. Mikrobiologia käyttää tätä menetelmää seerumien, toksiinien ja toksoidien titraamiseen sekä niiden terapeuttisen aktiivisuuden määrittämiseen. Toksiinin neutraloinnin vahvuus määritetään tavanomaisilla yksiköillä - AE.
Tämän reaktion ansiostamäärittää eksotoksiinin laji tai tyyppi. Tätä käytetään jäykkäkouristusten, kurkkumien, botulismin diagnosointiin. Tutkimus voidaan suorittaa sekä "lasilla" että geelissä.
Lyysireaktio (RL)
Näitä spesifisiä vasta-aineita kutsutaan"täydentää". Sitä löytyy melkein kaikista kehon nesteistä, sillä on monimutkainen proteiinirakenne ja se on erittäin herkkä lämpötilan nousulle, ravistelulle, hapoille ja suoralle auringonvalolle. Kuivatussa tilassa se pystyy kuitenkin säilyttämään hajoamisominaisuutensa jopa kuuden kuukauden ajan.
Tämän tyyppisiä serologisia reaktioita on olemassa:
- bakteriolyysi;
- hemolyysi.
Bakteriolyysi suoritetaan käyttämällä veriseerumiapotilaan ja spesifinen immuuniseerumi elävien mikrobien kanssa. Jos veressä on riittävä määrä komplementtia, tutkija näkee bakteerien hajoamisen ja reaktion katsotaan olevan positiivinen.
Veren toinen serologinen reaktio onse, että potilaan punasolujen suspensiota hoidetaan seerumilla, joka sisältää hemolysiinejä, jotka aktivoituvat vain tietyn kohtelun läsnä ollessa. Jos sellainen on, laboratorion assistentti havaitsee punasolujen liukenemisen. Tätä reaktiota käytetään laajasti nykyaikaisessa lääketieteessä määrittämään kompressorin tiitteri (toisin sanoen pienin määrä, joka aiheuttaa punasolujen hajoamisen) veriseerumissa ja komplementin sitoutumismäärityksen suorittamiseksi. Tällä tavoin suoritetaan serologinen reaktio kuppa - Wassermanin reaktio.
Komplementin kiinnitysreaktio (CBC)
Tähän asti olemme kuvanneet yksinkertaisiaserologiset reaktiot. CSC: tä pidetään monimutkaisena reaktiona, koska siinä ei ole vuorovaikutuksessa kaksi, vaan kolme elementtiä: vasta-aine, antigeeni ja komplementti. Sen olemus on siinä, että vasta-aineen ja antigeenin välinen vuorovaikutus tapahtuu vain komplimentiproteiinien läsnä ollessa, jotka adsorboituvat muodostuneen AG-AT-kompleksin pinnalle.
Antigeenit itse komplementin lisäämisen jälkeentehdään merkittäviä muutoksia, jotka osoittavat suoritetun reaktion laadun. Se voi olla hajoaminen, hemolyysi, immobilisointi, bakterisidinen tai bakteriostaattinen vaikutus.
Reaktio itsessään tapahtuu kahdessa vaiheessa:
- Antigeeni-vasta-ainekompleksin muodostuminen, joka ei ole visuaalisesti näkyvissä tutkijalle.
- Antigeenimuutos komplementin vaikutuksesta.Tämä vaihe voidaan useimmiten jäljittää paljaalla silmällä. Jos reaktio ei ole näkyvissä visuaalisesti, muutosten tunnistamiseksi käytetään lisäindikaattorijärjestelmää.
Ilmaisinjärjestelmä
Tämä reaktio perustuu komplementin sitoutumiseen.Puhdistetut oinan punasolut ja hemolyyttinen seerumi, joka ei sisällä komplementtia, lisätään koeputkeen tunnin kuluttua RSC: n asettamisesta. Jos sitoutumaton komplementti jää koeputkeen, se liittyy karitsan verisolujen ja hemolysiinin väliin muodostuneeseen AG-AT-kompleksiin ja saa ne liukenemaan. Tämä tarkoittaa, että RSK on negatiivinen. Jos punasolut pysyvät ehjinä, reaktio on vastaavasti positiivinen.
Hemagglutinaatioreaktio (HA)
Ja toinen reaktio ei ole serologinen,koska punasolut reagoivat virusten tuottamien hemagglutiniinien kanssa. Koska kukin taudinaiheuttaja vaikuttaa vain spesifisiin punasoluihin (kana, karitsa, apina), tätä reaktiota voidaan pitää erittäin spesifisenä.
Ymmärrä, positiivinen tai negatiivinen,se on mahdollista verisolujen sijainnin avulla koeputken pohjassa. Jos niiden kuvio muistuttaa käänteistä sateenvarjoa, haluttua virusta esiintyy potilaan veressä. Ja jos kaikki punasolut ovat muodostuneet kolikkopylvään tavoin, etsittyjä taudinaiheuttajia ei ole läsnä.
Hemagglutinaation esto-reaktio (RTGA)
Tämä on erittäin spesifinen reaktio, jonka avulla voit selvittää virusten tyypin, tyypin tai spesifisten vasta-aineiden läsnäolon potilaan veriseerumissa.
Sen ydin on siinä, että vasta-aineet,lisättiin koeputkeen testimateriaalin kanssa, estäen antigeenien laskeutumisen punasoluihin ja pysäyttäen siten hemagglutinaation. Tämä on laadullinen merkki spesifisten kohdevirusten spesifisten antigeenien läsnäolosta veressä.
Immunofluoresenssireaktio (RIF)
Käytännössä nämä serologiset reaktiot on jaettu kahteen tyyppiin: suorat ja epäsuorat.
Suora RIF tuotetaan antigeenillä, jokaesikäsitelty fluoresoivalla seerumilla. Ja epäsuorasti lääkettä hoidetaan ensin tavanomaisella diagnostisella sarjalla, joka sisältää antigeenejä haluttuille vasta-aineille, ja sitten levitetään uudelleen luminoiva seerumi, joka on spesifinen AG-AT-kompleksin proteiineille, ja mikrobisolut tulevat näkyviin mikroskopiassa.
