Κανόνες για τον προσδιορισμό της ομάδας αίματος σύμφωνα με το σύστημα ABO

Η διαδικασία για τον προσδιορισμό των ομάδων αίματος σύμφωνα με το σύστημα ΑΒΟσυνίσταται στην ανίχνευση αντιγόνων Α και Β στα ερυθροκύτταρα χρησιμοποιώντας τυπικά αντισώματα και τη χρήση συγκολλητινών στο πλάσμα ή στον ορό του αναλυθέντος αίματος με τυπικά ερυθροκύτταρα. Η τεχνική αναπτύχθηκε στις αρχές του 20ού αιώνα και εξακολουθεί να χρησιμοποιείται ενεργά στην ιατρική. Ο προσδιορισμός των αντιγόνων Α και Β πραγματοποιείται χάρη στους αντι-Α και στους αντι-Β τκολικούς.

Βασικές έννοιες

Όχι μόνο τα αντιγόνα προσδιορίζονται πάντα από δότεςσε ερυθροκύτταρα, αλλά και συγκολλητίνες στον ορό (πλάσμα) χρησιμοποιώντας τυπικά ερυθροκύτταρα. Το φλεβικό αίμα χρησιμοποιείται ως βιοϋλικό. Πριν από τη μελέτη, είναι απαραίτητο να εγκαταλείψετε τα λιπαρά τρόφιμα μια ημέρα πριν από την ανάλυση και να μην καπνίζετε για μισή ώρα πριν από τη δοκιμή. Οι ομάδες αίματος προσδιορίζονται δύο φορές: πρώτα στο ιατρικό τμήμα, όπου προμηθεύεται το υλικό και στη συνέχεια επιβεβαιώνεται από έρευνα στο εργαστήριο.

Ο προσδιορισμός των ομάδων αίματος σύμφωνα με το σύστημα ΑΒΟ είναιτο κύριο τεστ που χρησιμοποιείται στην μεταγγειολογία. Μερικά ζώα έχουν επίσης παρόμοιο σύστημα ομάδων αίματος, όπως χιμπατζήδες, γορίλες και μπονόμπο.

Ιστορικό ανακαλύψεων

Υπάρχει μια γενικά αποδεκτή άποψη στην επιστήμη ότιΗ μέθοδος προσδιορισμού ομάδων αίματος σύμφωνα με το σύστημα ABO ανακαλύφθηκε για πρώτη φορά από τον Karl Landsteiner, έναν Αυστριακό επιστήμονα, το 1900. Στη συνέχεια, περιέγραψε στο έργο του τρεις τύπους αντιγόνων. Για αυτό τριάντα χρόνια αργότερα του απονεμήθηκε το βραβείο Νόμπελ στην Ιατρική και τη Φυσιολογία. Λόγω του γεγονότος ότι δεν υπήρχαν στενοί δεσμοί μεταξύ των επιστημόνων στο παρελθόν, διαπιστώθηκε αργότερα ότι ο Τσέχος ορολόγος Jan Jansky, ανεξάρτητα από την έρευνα του K. Landsteiner, περιέγραψε για πρώτη φορά τέσσερις ομάδες ανθρώπινου αίματος, αλλά η έρευνά του δεν ήταν γνωστή σε ευρύ κοινό. Προς το παρόν, είναι η ταξινόμηση που ανέπτυξε ο Y. Yansky που χρησιμοποιείται στη Ρωσία και στις δημοκρατίες της πρώην ΕΣΣΔ. Στις Ηνωμένες Πολιτείες, ο W. L. Moss έγραψε παρόμοιο έργο το 1910.

Μέθοδος για τον προσδιορισμό των ομάδων αίματος σύμφωνα με το σύστημα ΑΒΟ με τη χρήση τσοκολλονών

Η ομάδα αίματος πρέπει να προσδιορίζεται σε ένα δωμάτιο μεκαλός φωτισμός διατηρώντας παράλληλα ένα εύρος θερμοκρασίας από 15 έως 25 βαθμούς Κελσίου, καθώς οι αποκλίσεις από αυτόν τον κανόνα μπορεί να επηρεάσουν τα αποτελέσματα των δοκιμών. Τα αρχικά και το επώνυμο του ασθενούς είναι γραμμένα σε ένα πιάτο ή πλάκα. Από αριστερά προς τα δεξιά ή σε κύκλο, εφαρμόζονται οι τυπικές ονομασίες ομάδων (O (I), A (II), B (III)). Παρακάτω τοποθετούνται σταγόνα σταγόνα ο αντίστοιχος ορός με ξεχωριστές πιπέτες για κάθε τύπο. Στη συνέχεια προστίθεται αίμα του ασθενούς. Το υλικό για την έρευνα προέρχεται από το λοβό ή το δάχτυλο. Αυτό απαιτείται από την τεχνική προσδιορισμού της ομάδας αίματος σύμφωνα με το σύστημα ΑΒΟ.

Είναι επίσης νόμιμο να χρησιμοποιείτε ερυθρά αιμοσφαίρια,στον δοκιμαστικό σωλήνα μετά το σχηματισμό του θρόμβου. Είναι απαραίτητο η ποσότητα του ορού να είναι δέκα φορές μεγαλύτερη από την προστιθέμενη ποσότητα αίματος. Μετά από αυτό, οι σταγόνες αναμιγνύονται με γυάλινες ράβδους (ξεχωριστά για κάθε μία). Μέσα σε πέντε λεπτά, κουνώντας απαλά την πλάκα, παρακολουθήστε την εμφάνιση της αντίδρασης αιμοσυγκόλλησης. Βρίσκεται στο γεγονός ότι εμφανίζονται μικρά κόκκινα εξογκώματα και στη συνέχεια συγχωνεύονται σε μεγαλύτερα. Αυτή τη στιγμή, ο ορός χάνει σχεδόν εντελώς το χρώμα του.

Προκειμένου να εξαλειφθεί η ψευδή αιμοσυγκόλλησηαπλή κόλληση ερυθροκυττάρων, πρέπει να προσθέσετε μια σταγόνα αλατούχου διαλύματος μετά από τρία λεπτά και να ελέγξετε εάν η συγκόλληση επιμένει. Εάν ναι, τότε είναι αλήθεια. Αυτό είναι, ο ορισμός των ομάδων αίματος σύμφωνα με το σύστημα ABO είναι πλέον πλήρης.

Ερμηνεία των αποτελεσμάτων

Ως αποτέλεσμα, μπορούν να παρατηρηθούν τέσσερις αντιδράσεις:

• δεν συμβαίνει συγκόλληση με οποιονδήποτε από τους ορούς - η πρώτη ομάδα είναι O (I).
• η αντίδραση εκδηλώθηκε με τους ορούς I (ab) και III (a) - τη δεύτερη ομάδα Α (II) ·
• η συγκόλληση συμβαίνει με τους ορούς I (ab) και II (b) - την τρίτη ομάδα B (III).
• εάν η αντίδραση συμβαίνει με τρεις ορούς,Είναι απαραίτητο να πραγματοποιηθεί μια πρόσθετη διαδικασία με αντιδραστήρια της ομάδας ΑΒ (IV), τα οποία είναι τυπικά. Εάν δεν υπάρχει συγκόλληση σε μια τέτοια πτώση, μπορούμε να υποθέσουμε ότι αυτή είναι η 4η ομάδα αίματος ΑΒ (IV).

Γρήγορη μέθοδος για τον παράγοντα Rh

Η μέθοδος προσδιορισμού ομάδων αίματος σύμφωνα με το σύστημα ΑΒΟ περιλαμβάνει την ταυτόχρονη αναγνώριση του παράγοντα Rh (Rh).

Η επιφάνεια της πλάκας είναι προ-βρεγμένη καιγράψτε "ορός ελέγχου" και "ορός αντι-ρέσου". Στη συνέχεια, μία ή δύο σταγόνες των απαιτούμενων αντιδραστηρίων τοποθετούνται κάτω από τις επιγραφές και προστίθεται το αναλυθέν υλικό σε αυτά. Για να το κάνετε αυτό, μπορείτε επίσης να χρησιμοποιήσετε αίμα από το δάχτυλο (στην ίδια ποσότητα με τον όγκο του ορού) ή ερυθροκύτταρα που παραμένουν στο κάτω μέρος του σωλήνα μετά την εμφάνιση θρόμβου (το ήμισυ του όγκου του ορού). Η επιλογή υλικού δεν επηρεάζει το τελικό αποτέλεσμα. Στη συνέχεια, το αίμα και ο ορός αναμιγνύονται με ξηρή γυάλινη ράβδο, μετά την οποία η αντίδραση αναμένεται για πέντε λεπτά. Προκειμένου να εξαλειφθούν οι ψευδείς μετρήσεις, προστίθεται ισοτονικό διάλυμα χλωριούχου νατρίου μετά από τρία έως τέσσερα λεπτά (μόνο μερικές σταγόνες). Ο προσδιορισμός της ομάδας αίματος σύμφωνα με το σύστημα ABO και Rh πραγματοποιείται πολύ συχνά.

Εάν η συγκόλληση των ερυθροκυττάρων πέφτει μεεμφανίζεται ορός, αυτό υποδηλώνει Rh θετικό αίμα. Σύμφωνα με στατιστικά στοιχεία, το Rh + βρίσκεται στο 85% του παγκόσμιου πληθυσμού. Η απουσία του μας επιτρέπει να μιλάμε για Rh-αρνητική σχέση. Εάν εμφανιστεί συγκόλληση στον ορό ελέγχου, τότε έχει γίνει άχρηστο. Δυστυχώς, ο αλγόριθμος προσδιορισμού της ομάδας αίματος ABO δεν λειτουργεί πάντα τέλεια.

Ποια λάθη μπορούν να γίνουν με αυτήν την τεχνική;

Οι ανακρίβειες στον προσδιορισμό της ύπαρξης αίματος σε μια συγκεκριμένη ομάδα εξαρτώνται από τους ακόλουθους λόγους:

• Τεχνικός.
• Η βιολογική ειδικότητα του υπό μελέτη αίματος.
• Ελαττωματικός χαρακτήρας των τυπικών ορών και των ερυθροκυττάρων.

Τεχνικά λάθη

Πιθανά σφάλματα κατά τον προσδιορισμό της ομάδας αίματος του συστήματος ABO με σταυρό τρόπο:

• Ο ορός δεν τοποθετήθηκε σωστά στο πιάτο
• Λανθασμένες ποσοτικές αναλογίες του υλικού.
• Χρησιμοποιείτε ανεπαρκώς καθαρά πιάτα ήπλάκες που έρχονται σε επαφή με αίμα (κάθε ορός πρέπει να συλλέγεται με ξεχωριστή πιπέτα, η οποία πρέπει να πλένεται με διάλυμα χλωριούχου νατρίου (σε συγκέντρωση 0,9%)).
• Εσφαλμένη καταγραφή του αναλυθέντος υλικού.
• Μη συμμόρφωση με τον απαιτούμενο χρόνο γιατην έναρξη της συγκόλλησης, - δεν πρέπει να βιαστείτε και να λάβετε υπόψη την αντίδραση πριν από τη λήξη των πέντε λεπτών, επειδή μπορεί να υπάρχουν αδύναμα συγκολλητογόνα στο αίμα. Η υπερέκθεση δεν αξίζει επίσης, επειδή οι σταγόνες μπορούν να στεγνώσουν από τις άκρες και να οδηγήσουν σε ψευδές συμπέρασμα. Είναι σημαντικό να ακολουθήσετε τους κανόνες για τον προσδιορισμό της ομάδας αίματος σύμφωνα με το σύστημα ABO.
  
• Η λανθασμένη φυγοκέντρηση μπορεί επίσης να οδηγήσει σε ψευδή αποτελέσματα.
• Η θερμοκρασία του αέρα υπερβαίνει την επιτρεπόμενηεπηρεάζει την απουσία συγκόλλησης. Για να αποφύγετε τέτοιου είδους λάθη, πρέπει να χρησιμοποιήσετε έναν ειδικό ορό που έχει σχεδιαστεί για να λειτουργεί σε ζεστά κλίματα. Είναι απαραίτητο να προσδιοριστούν οι ομάδες αίματος σε μια πλάκα ή πλάκα, η εξωτερική επιφάνεια της οποίας κατεβαίνει σε κρύο νερό.

Βιολογικά ειδικά σφάλματα

Τα σφάλματα που σχετίζονται με τη βιολογική ειδικότητα του αναλυθέντος αίματος χωρίζονται σε δύο τύπους.

• Εξαρτάται από τα χαρακτηριστικά των ερυθροκυττάρων.
• Λάθη λόγω των βιολογικών χαρακτηριστικών του ορού.

Ας εξετάσουμε κάθε τύπο με περισσότερες λεπτομέρειες.

Εξαρτάται από τα χαρακτηριστικά των ερυθροκυττάρων

• Καθυστερημένη συγκόλληση που αποδίδεται σε "αδύναμους"μορφές ερυθροκυττάρων και αντιγόνων. Προκειμένου να αποφευχθούν λάθη, είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί η ομάδα αίματος των δοτών και των παραληπτών χρησιμοποιώντας τυπικά ερυθροκύτταρα. Προσδιορίστε το συγκολλητογόνο Α₂ θα πρέπει να επανεξεταστεί με άλλους τύπους αντιδραστηρίων και άλλων σκευών, αυξάνοντας τον χρόνο καταχώρισης της αντίδρασης.
• «Παναγλουτισμός» («αυτοσυγκόλληση») - δεξιότητατο αίμα εμφανίζει την ίδια μη ειδική αντίδραση με όλους τους ορούς, συμπεριλαμβανομένου του δικού σας. Μετά από πέντε λεπτά, η σοβαρότητα αυτής της συγκόλλησης εξασθενεί, αν και θα πρέπει να αυξηθεί. Παρόμοιες περιπτώσεις παρατηρούνται σε καρκινοπαθείς, ασθενείς με εγκαύματα, κ.λπ. Ως έλεγχος, είναι απαραίτητο να εκτιμηθεί η εκδήλωση συγκόλλησης των αναλυθέντων ερυθροκυττάρων στον τυπικό ορό της τέταρτης ομάδας και του φυσιολογικού ορού. Όταν η "αιματογλυφωτική" ομάδα αίματος προσδιορίζεται ως αποτέλεσμα της τριπλής πλύσης ερυθροκυττάρων Εάν δεν δώσει το επιθυμητό αποτέλεσμα, αξίζει να ξαναγράψετε ένα δείγμα αίματος σε έναν σωλήνα που έχει προθερμανθεί πριν από τη διαδικασία και να τοποθετήσετε το δείγμα σε ένα θερμοδοχείο για να διατηρήσετε τη θερμοκρασία 37 βαθμών Κελσίου και άνω. Στη συνέχεια θα πρέπει να μεταφερθεί στο εργαστήριο όπου διατηρείται η παραπάνω θερμοκρασία και να χρησιμοποιείται θερμαινόμενο αλατούχο διάλυμα, πλάκα και αντιδραστήρια.

• Μερικές φορές τα ερυθρά αιμοσφαίρια στο δείγμα αίματοςείναι διατεταγμένα σαν "κολόνες νομισμάτων", και μπορεί να εκληφθούν ως συγκολλητικά. Εάν προσθέσετε δύο σταγόνες ισοτονικού διαλύματος και ανακινήσετε απαλά το δισκίο, τα ερυθρά αιμοσφαίρια βρίσκονται στη σωστή θέση.
• Ατελής ή μικτή συγκόλληση που εμφανίζεται σε ασθενείς με τη δεύτερη, τρίτη και τέταρτη ομάδα ως αποτέλεσμα της μεταμόσχευσης μυελού των οστών ή τους τρεις πρώτους μήνες μετά τη μετάγγιση αίματος 0 (I).

Βιολογικός ορός

• Κατά τη διάρκεια των δοκιμών ρουτίνας, ως αποτέλεσμαπροηγούμενη ευαισθητοποίηση, ανιχνεύθηκαν αντισώματα διαφορετικής ειδικότητας. Είναι απαραίτητο να προσδιοριστεί και να επιλεγούν ερυθροκύτταρα χωρίς το περιεχόμενο του αντιγόνου στο οποίο ανιχνεύθηκε η ανοσοποίηση. Ο παραλήπτης πρέπει να είναι βέβαιος να επιλέξει ένα συμβατό αίμα δότη ξεχωριστά.
• Δεν υπάρχουν αντισώματα Α και Β, τα οποία παρατηρούνται σε νεογέννητα και ασθενείς που πάσχουν από καταστολή της χυμικής ανοσίας.
• Με το σχηματισμό "κολώνων νομισμάτων" ανώμαλητο αποτέλεσμα πρέπει να επιβεβαιωθεί λαμβάνοντας τυπικά ερυθροκύτταρα της πρώτης ομάδας. Το διάλυμα χλωριούχου νατρίου και το κούνημα πλάκας βοηθούν στη διάκριση μεταξύ των πραγματικών συγκολλητικών και των ράβδων νομισμάτων.
  

Σφάλματα που σχετίζονται με τη χρήση ελαττωματικών τυπικών ερυθροκυττάρων και ορών

Οι αδύναμοι οροί με ημερομηνία λήξης ή με τίτλο μικρότερο από 1:32 μπορούν να προκαλέσουν αδύναμη και καθυστερημένη συγκόλληση. Η χρήση τέτοιων αντιδραστηρίων είναι απαράδεκτη.

Χρήση μη χρησιμοποιήσιμων τυπικών ερυθρών αιμοσφαιρίωνή οροί που παρασκευάζονται υπό μη στείρες συνθήκες και διατηρούνται ανεπαρκώς, οδηγεί στην εμφάνιση "βακτηριακής" συγκόλλησης μη ειδικής φύσης.

Υπάρχουν πολλές δημοφιλείς υποθέσειςομάδες αίματος του συστήματος ΑΒΟ που εμφανίστηκαν αμέσως μετά την ανίχνευσή του σε διαφορετικούς κόσμους. Έτσι, για παράδειγμα, στη δεκαετία του 30 του περασμένου αιώνα στην Ιαπωνία και σε ορισμένες άλλες χώρες, μια θεωρία που συνδέει μια ομάδα αίματος με έναν συγκεκριμένο τύπο προσωπικότητας κέρδισε δημοτικότητα. Παρόμοιες θεωρίες είναι δημοφιλείς σήμερα.

Υπάρχει επίσης η άποψη ότι ένα άτομο με την ομάδα Α είναι ευαίσθητο σε σοβαρή απόλυση, το Ο σχετίζεται με καλά δόντια και η ομάδα Α2 έχει το υψηλότερο επίπεδο IQ Όμως τέτοιοι ισχυρισμοί δεν έχουν αποδειχθεί επιστημονικά.

Εξετάσαμε τον προσδιορισμό των ομάδων αίματος από το σύστημα ΑΒΟ χρησιμοποιώντας τυπικούς ορούς.