Terminas „mikroskopija“ turi graikiškas šaknis. Išvertus, tai reiškia objektų tyrimą naudojant didelio tikslumo instrumentus. Pastaruoju metu jis vis labiau populiarėja liuminescencija ir elektroninė mikroskopija.
Rezoliucija
Paprastai tai suprantama kaip minimumasatstumas, kuriuo gali būti aiškiai matomi daiktai. Įsiskverbimo į mikroskopinį pasaulį laipsnis, galimybė atsižvelgti į tiriamo elemento dydį priklausys nuo įrangos skiriamosios gebos. Dideliu padidinimu objekto ribos gali susilieti. Atitinkamai yra tam tikros ribos, kurias peržengus elementų priartinimas yra beprasmis.
Fluorescencijos mikroskopijos metodas: mechanizmas
Konvertuojant energiją, kurią ji sugeriamedžiagos, matomoje spinduliuotėje atsiranda švytėjimas. Tai vadinama liuminescencija. Šis reiškinys yra dėl to, kad kai kurios medžiagos, veikiamos šviesos, pradeda skleisti kitokio (dažniausiai ilgo) bangos ilgio spindulius. Be to, kai kurie objektai, turintys tam tikrą spalvą esant normaliam apšvietimui, ultravioletinių spindulių įtakoje keičia savo spalvą.
Ypatybės
Objektas, kurio negalima pamatyti ultravioletinėje šviesoješviesa gali skleisti ryškų blizgesį, jei ji apdorojama specialia medžiaga. Joje tamsoje elementai šviečia skirtingomis spalvomis. Spinduliavimo stiprumas skiriasi, tačiau paprastai jis yra mažas. Šiuo atžvilgiu fluorescencinė mikroskopija yra efektyvi užtemdytoje patalpoje. Naudojant tokio tipo tyrimus, objektas yra vertinamas šviesoje, kurią jis pats skleidžia. Cheminė audinių ir ląstelių sudėtis turės įtakos tyrimo kokybei. Liuminescencijos mikroskopija tam tikru mastu laikoma histocheminiu tyrimu.
Klasifikacija
Liuminescencijos mikroskopija gali būti pirminis arba antrinis. Pastaruoju atveju objektas apdorojamas specialiais junginiais, kurie suteikia švytėjimo. Pirminis fluorescencinė mikroskopija remiasi vidiniu tiriamo elemento gebėjimu skleisti šviesą.
Įranga
Fluorescencinė mikroskopija atliekama sunaudojant įvairius prietaisus. Jų pagrindinis elementas yra apšvietimas. Jame įrengta UV lempa. Be to, prietaisai naudoja filtrų rinkinį. Kai kuriuose įrenginiuose jų yra gana daug skirtingų konfigūracijų. Priklausomai nuo to, kokia spalva naudojama sužadinti liuminescenciją - ultravioletinę ar mėlyną, tarp šviesos šaltinio ir tiriamojo objekto dedamas atitinkamas filtras. Kadangi mikroskopinio elemento švytėjimas yra energetiškai silpnesnis už jaudinančią šviesą, jis bus užfiksuotas tik esant vienoms sąlygoms. Perteklinius spindulius, sklindančius iš šaltinio, turi nutraukti geltonai žalios spalvos filtras. Jis dedamas ant instrumento okuliaro. Ryškiausias liuminescencijos efektas bus tada, kai filtras visiškai nutrauks spindulius, sklindančius iš šviesos šaltinio.
Iš ko susideda matomos šviesos instaliacija?Jame yra ryškios šviesos šaltinis ir biologinis mikroskopas. Tarp prietaiso veidrodžio ir lempos sumontuotas mėlynai violetinis filtras. Tai gali būti FS-1, UFS-3 ir pan. Geltonas filtras tinka ant mikroskopo okuliaro. Jų pagalba ant objekto patenka mėlynai violetinė šviesa. Tai taip pat sužadina liuminescenciją. Tačiau ši šviesa gali trukdyti matyti švytėjimą. Todėl pakeliui į akį jį nupjauna geltonas filtras. Apšvietimas įrengiamas naudojant Koehlerio metodą, išskyrus vieną išimtį. Kondensatoriaus diafragma turi būti visiškai atidaryta. Bandant svarbu naudoti ne fluorescuojančią panardinamąją alyvą. Norint sumažinti savo švytėjimą, į jį pridedama nitrobenzeno (2–10 lašų / 1 g).
Liuminescencijos mikroskopija: mikrobiologijos taikymai
Šio tipo tyrimų privalumai yra šie:
- Galimybė gauti spalvotus vaizdus.
- Aukšto kontrasto lygis, skleidžiantis elementus juodame fone.
- Tam tikrų tipų virusų ir mikrobų aptikimas ir lokalizavimas.
- Gebėjimas tirti skaidrius ir neskaidrius gyvus organizmus.
- Gyvenimo procesų tyrimas jų dinamikoje.
Taip pat reikia pasakyti, kad liuminescencinė mikroskopija prisideda prie geriausių histochemijos ir citochemijos metodų, ekspresinės diagnostikos, kūrimo.
