Säännöt veriryhmän määrittämiseksi ABO-järjestelmässä

Menetelmä veriryhmien määrittämiseksi ABO: llaon identifioida antigeenit A ja B erytrosyyteissä käyttäen standardeja vasta-aineita ja agglutiniinien käyttöä analysoidun veren plasmassa tai seerumissa tavallisilla erytrosyyteillä. Tekniikka kehitettiin 1900-luvun alussa ja sitä käytetään edelleen lääketieteessä. Antigeenien A ja B määrittäminen suoritetaan anti-A- ja anti-B-syklonien ansiosta.

Peruskäsitteet

Luovuttajat tunnistavat aina vain antigeenit.erytrosyyteissä, mutta myös agglutiniinit seerumissa (plasmassa) käyttäen standardeja erytrosyyttejä. Verisuonia käytetään biomateriaalina. Ennen tutkimusta sinun täytyy luopua rasvaisista elintarvikkeista analyysia edeltävänä päivänä ja älä tupakoida puolen tunnin ajan ennen testiä. Veriryhmät määritetään kahdesti: ensin lääketieteellisessä osastossa, jossa materiaali kerätään, ja sitten vahvistetaan laboratoriotutkimuksella.

ABO: n veriryhmien määritys onpääasiallinen testi, jota käytetään verensiirtoihin. Samankaltainen veriryhmien järjestelmä on myös joissakin eläimissä, esimerkiksi simpansseissa, gorilloissa ja bonoboissa.

Discovery-historia

Tieteessä on yleisesti hyväksytty näkemysKarl Landsteiner, itävaltalainen tutkija, tunnisti ensin vuonna 1900 menetelmän veriryhmien määrittämiseksi käyttäen ABO-järjestelmää. Sitten hän kuvasi työssäan kolmenlaisia ​​antigeenejä. Tämän vuoksi kolmenkymmenen vuoden jälkeen hän sai Nobelin palkinnon lääketieteessä ja fysiologiassa. Koska tiedemiesten välillä ei ollut läheisiä siteitä, myöhemmin todettiin, että Tšekin serologi Jan Jansky kuvasi K. Landsteinerin tutkimuksesta riippumatta ensin neljä ihmisen veriryhmää, mutta laaja tutkimus ei ollut tiedossa. Tällä hetkellä luokitusta on kehittänyt J. Jansky, jota käytetään Venäjällä ja entisen Neuvostoliiton tasavalloissa. Yhdysvalloissa William L. Moss loi samanlaisen työnsa vuonna 1910.

Menetelmä veriryhmien määrittämiseksi ABO-järjestelmässä syklonien avulla

Verityyppi on määritettävä huoneessahyvä valaistus lämpötila-alueella 15 - 25 astetta, koska poikkeamat tästä normistosta voivat vaikuttaa tutkimuksen tuloksiin. Alustajat ja potilaan sukunimi kirjoitetaan levylle tai levylle. Laita vasemmalta oikealle tai ympyrään vakiomerkinnät (O (I), A (II), B (III)). Niiden alle asetetaan pisaroittain vastaava seerumi, jossa on erilliset pipetit kullekin lajille. Sitten lisätään potilaan veri. Tutkimuksen materiaali on otettu korvakorusta tai sormesta. Tämä edellyttää tekniikkaa veriryhmän määrittämiseksi ABO-järjestelmässä.

On myös oikeutettua käyttää punasoluja,in vitro, kun hyytymä on muodostunut. On välttämätöntä, että seerumin määrä oli yli kymmenen kertaa veren määrä. Tämän jälkeen pisarat sekoitetaan lasitikkuihin (erikseen kullekin). Viiden minuutin kuluessa, ravistamalla levyä varovasti katsomalla hemagglutinaatioreaktion ulkonäköä. On todettu, että pienet punaiset palat näkyvät, sitten sulautuvat suuremmiksi. Seerumi tällöin lähes menettää värinsä.

Väärän hemagglutinaation poistamiseksiyksinkertainen liimaus erytrosyytteihin, sinun täytyy kolme minuuttia lisätä yksi tippa suolaliuosta ja tarkistaa, jatkuuko agglutinaatio. Jos on, niin se on totta. Kaikki, ABO-järjestelmän veriryhmien määritelmä on valmis.

Tulosten tulkinta

Tämän seurauksena voi tapahtua neljä reaktiota:

• agglutinaatiota ei tapahdu millään seerumista - ensimmäinen ryhmä on O (I);
• reaktio ilmeni seerumeilla I (ab) ja III (a) - toinen ryhmä A (II);
• agglutinaatio tapahtuu seerumien I (ab) ja II (b) kanssa - kolmas ryhmä B (III);
• jos reaktio tapahtuu kolmen seerumin kanssa,lisämenetelmä on suoritettava ryhmän AB (IV) reagensseilla, jotka ovat vakiona; jos tällaisessa pisarassa ei ole agglutinaatiota, voidaan olettaa, että tämä on 4. veriryhmä AB (IV).

Nopea menetelmä Rh-tekijälle

Menetelmä veriryhmien määrittämiseksi ABO-järjestelmän mukaan sisältää Rh-tekijän (Rh) samanaikaisen havaitsemisen.

Levyn pinta on kostutettu jakirjoita siihen "kontrolliseerumi" ja "anti-rhesus seerumi". Sitten yksi tai kaksi tippaa tarvittavia reagensseja laitetaan merkintöjen alle ja analysoitu materiaali lisätään niihin. Tätä varten voit käyttää myös verta sormesta (samassa määrin kuin seerumin tilavuus) tai erytrosyyttejä, jotka ovat jäljellä putken pohjassa hyytymän ilmestymisen jälkeen (puolet seerumin tilavuudesta). Materiaalin valinta ei vaikuta lopputulokseen. Sitten veri ja seerumi sekoitetaan kuivaan lasisauvaan, minkä jälkeen reaktion odotetaan viiden minuutin ajan. Väärien lukemien eliminoimiseksi lisätään isotonista natriumkloridiliuosta kolmen tai neljän minuutin kuluttua (vain muutama tippa). Veriryhmän määritys ABO- ja Rh-järjestelmän mukaan suoritetaan hyvin usein.

Jos punasolujen agglutinaatio tipassaseerumia esiintyy, tämä osoittaa Rh-positiivista verta. Tilastojen mukaan Rh +: ta esiintyy 85 prosentissa maailman väestöstä. Sen puuttuminen antaa meille mahdollisuuden puhua Rh-negatiivisesta kuulumisesta. Jos kontrolliseerumissa esiintyy agglutinaatiota, siitä on tullut käyttökelvoton. Valitettavasti ABO-veriryhmän määritysalgoritmi ei aina toimi täydellisesti.

Mitä virheitä tällä tekniikalla voidaan tehdä?

Epätarkkuudet määritettäessä veren kuulumista tiettyyn ryhmään riippuvat seuraavista syistä:

• Tekninen.
• Tutkittavan veren biologinen spesifisyys.
• Vakioseerumien ja punasolujen viallinen luonne.

Tekniset virheet

Mahdolliset virheet määritettäessä ABO-järjestelmän veriryhmä ristiin:

• Seerumi väärin levyllä.
• Materiaalin virheelliset määrälliset suhteet.
• Riittämättömän puhtaiden astioiden käyttö taiveren kanssa kosketuksiin joutuvat levyt (jokainen seerumi on kerättävä erillisellä pipetillä, joka on pestävä natriumkloridiliuoksella (konsentraatiossa 0,9%)).
• Väärät tiedot analysoidusta materiaalista.
• Tarvittavan ajan noudattamatta jättäminenagglutinaation alkaminen - sinun ei pitäisi kiirehtiä ja ottaa huomioon reaktio ennen viiden minuutin päättymistä, koska veressä voi olla heikkoja agglutinogeenejä. Ylivalotus ei myöskään ole sen arvoinen, koska pisarat voivat kuivua reunoista ja johtaa väärään johtopäätökseen. On tärkeää noudattaa sääntöjä veriryhmän määrittämiseksi ABO-järjestelmän mukaan.
  
• Väärä sentrifugointi voi myös johtaa vääriin tuloksiin.
• Ilman lämpötila ylittää sallitunvaikuttaa agglutinaation puuttumiseen. Tällaisten virheiden välttämiseksi sinun on käytettävä erityistä seerumia, joka on suunniteltu toimimaan kuumassa ilmastossa. Sinun on määritettävä veriryhmät levyllä tai levyllä, jonka ulkopinta lasketaan kylmään veteen.

Biologiset erityisvirheet

Analysoidun veren biologiseen spesifisyyteen liittyvät virheet on jaettu kahteen tyyppiin.

• Riippuu erytrosyyttien ominaisuuksista.
• Seerumin biologisista ominaisuuksista johtuvat virheet.

Tarkastellaan kutakin tyyppiä tarkemmin.

Riippuu punasolujen ominaisuuksista

• Myöhäinen agglutinaatio johtuu "heikosta"punasolujen ja antigeenien muodot. Virheiden välttämiseksi on tarpeen määrittää luovuttajien ja vastaanottajien veriryhmä tavanomaisilla punasoluilla. Tunnista agglutinogeeni A₂ tulisi tutkia uudelleen muun tyyppisillä reagensseilla ja muilla välineillä, mikä pidentää reaktion rekisteröintiaikaa.
• "Panagglutinaatio" ("autoagglutinaatio") - taitoveressä on sama epäspesifinen reaktio kaikkien seerumien kanssa, mukaan lukien omasi. Viiden minuutin kuluttua tällaisen agglutinaation vakavuus heikkenee, vaikka sen pitäisi kasvaa. Samanlaisia ​​tapauksia havaitaan syöpäpotilailla, palovammaisten potilailla jne. Kontrollina on tarpeen arvioida analysoitujen punasolujen agglutinaation ilmentyminen neljännen ryhmän standardiseerumissa ja suolaliuoksessa. Kun "panagglutinaation" veriryhmä määritetään punasolujen kolminkertaisen pesun seurauksena. Jos se ei anna toivottua tulosta, kannattaa ottaa verinäyte uudelleen ennen toimenpidettä lämmitettyyn putkeen ja laittaa näyte lämpösäiliöön pitämään 37 asteen ja sitä korkeampi lämpötila. Sitten se tulisi viedä laboratorioon, jossa ylläoleva lämpötila ylläpidetään ja käytetään kuumennettua suolaliuosta, levyä ja reagensseja.

• Joskus punasolut verinäytteessäon järjestetty kuten "kolikkapylväät", ja ne voidaan erehtyä agglutinaateiksi. Jos lisäät kaksi tippaa isotonista liuosta ja ravistat tablettia varovasti, punasolut ovat oikeassa asennossa.
• Puutteellinen tai sekoitettu agglutinaatio, jota esiintyy potilailla, joilla on toinen, kolmas ja neljäs ryhmä luuydinsiirron seurauksena tai verensiirron jälkeisten kolmen ensimmäisen kuukauden aikana 0 (I).

Biologinen seerumi

• Tuloksena rutiinitestauksen aikanaedellisen herkistymisen yhteydessä havaitaan vasta-aineita, joilla on erilainen spesifisyys. On tarpeen määrittää se ja valita punasolut ilman antigeenin pitoisuutta, jolle immunisointi havaittiin. Vastaanottajan on ehdottomasti valittava yhteensopiva luovuttajaveri erikseen.
• Ei ole olemassa vasta-aineita A ja B, joita havaitaan vastasyntyneillä ja potilailla, jotka kärsivät humoraalisen immuniteetin tukahduttamisesta.
• Muodostuessaan "kolikkosarakkeet" epänormaaliatulos on vahvistettava ottamalla ensimmäisen ryhmän standardit punasolut. Natriumkloridiliuos ja levysekoitus auttavat erottamaan todelliset agglutinaatit ja kolikkopalkit.
  

Viallisten punasolujen ja seerumien käyttöön liittyvät virheet

Heikot seerumit, joiden viimeinen käyttöpäivä on tai joiden titeri on alle 1:32, kykenevät tuottamaan heikkoa ja myöhäistä agglutinaatiota. Tällaisten reagenssien käyttöä ei voida hyväksyä.

Käyttökelvottomien tavallisten punasolujen käyttötai ei-steriileissä olosuhteissa valmistetut ja riittämättömästi säilötyt seerumit johtavat epäspesifisen "bakteeri" -agglutinaation esiintymiseen.

On monia suosittuja oletuksiaABO-järjestelmän veriryhmät, jotka ilmestyivät heti sen havaitsemisen jälkeen eri maailman kulttuureissa. Joten esimerkiksi Japanissa ja joissakin muissa maissa viime vuosisadan 30-luvulla suosittu teoria, joka yhdistää veriryhmän tietyntyyppiseen persoonallisuuteen. Samanlaiset teoriat ovat suosittuja tänään.

On myös mielipidettä, että A-ryhmän henkilö on altis vakavalle krapulalle, O liittyy hyviin hampaisiin ja ryhmä A2 liittyy korkeimpaan IQ-tasoon. Tällaisia ​​väitteitä ei kuitenkaan ole tieteellisesti todistettu.

Tutkimme veriryhmien määritystä ABO-järjestelmällä standardiseerumeilla.