ปฏิกิริยาทางเซรุ่มวิทยา: ประเภทการใช้งาน

การวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการเกือบทั้งหมดโรคติดเชื้อขึ้นอยู่กับการตรวจหาแอนติบอดีในเลือดของผู้ป่วยซึ่งผลิตขึ้นจากแอนติเจนของเชื้อโรคโดยวิธีปฏิกิริยาทางซีรั่ม พวกเขาเข้าสู่การปฏิบัติทางการแพทย์ตั้งแต่ปลายศตวรรษที่สิบเก้า - ต้นศตวรรษที่ยี่สิบ

การพัฒนาวิทยาศาสตร์ได้ช่วยในการตรวจหาแอนติเจนโครงสร้างของจุลินทรีย์และสูตรทางเคมีของสารพิษ สิ่งนี้ทำให้สามารถสร้างไม่เพียง แต่การรักษา แต่ยังรวมถึงซีรั่มการวินิจฉัยด้วย ได้มาจากการแนะนำเชื้อก่อโรคที่อ่อนแอให้กับสัตว์ทดลอง หลังจากผ่านไปหลายวัน การเตรียมการจะถูกเตรียมจากเลือดของกระต่ายหรือหนู ซึ่งใช้ในการระบุจุลินทรีย์หรือสารพิษของพวกมันโดยใช้การทดสอบทางซีรั่ม

การสำแดงภายนอกของปฏิกิริยาดังกล่าวขึ้นอยู่กับเงื่อนไขสำหรับการตั้งค่าและสถานะของแอนติเจนในเลือดของผู้ป่วย หากอนุภาคจุลินทรีย์ไม่ละลายน้ำ ก็จะตกตะกอน สลาย จับหรือตรึงในซีรัม หากแอนติเจนละลายได้ก็จะปรากฏปรากฏการณ์การวางตัวเป็นกลางหรือการตกตะกอน

การทดสอบการเกาะติดกัน (RA)

ปฏิกิริยาทางซีรั่ม

ปฏิกิริยาเกาะติดกันทางซีรั่มคือมีความเฉพาะเจาะจงสูง ดำเนินการได้ง่ายและชัดเจนพอที่จะระบุการปรากฏตัวของแอนติเจนในซีรัมในเลือดของผู้ป่วยได้อย่างรวดเร็ว ใช้เพื่อกำหนดปฏิกิริยาวิดัล (การวินิจฉัยไข้ไทฟอยด์และไข้รากสาดใหญ่) และไวเกิล (ไทฟัส)

มันขึ้นอยู่กับปฏิสัมพันธ์ที่เฉพาะเจาะจง specificระหว่างแอนติบอดีของมนุษย์ (หรือ agglutinins) กับเซลล์จุลินทรีย์ (agglutinogens) หลังจากปฏิสัมพันธ์ของพวกมันจะเกิดอนุภาคซึ่งตกตะกอน นี่เป็นสัญญาณบวก สำหรับการแสดงระยะปฏิกิริยา สามารถใช้สารจุลินทรีย์ที่มีชีวิตหรือถูกฆ่า เชื้อรา โปรโตซัว เซลล์เม็ดเลือด และเซลล์โซมาติก

ปฏิกิริยาถูกแบ่งออกเป็นสองขั้นตอน:

  1. การเชื่อมต่อเฉพาะของแอนติบอดี (AT) กับแอนติเจน (AG)
  2. ไม่เฉพาะเจาะจง - การตกตะกอนของกลุ่ม บริษัท AG-AT นั่นคือการก่อตัวของเกาะติดกัน

ปฏิกิริยาการเกาะติดกันทางอ้อม (RPHA)

การแสดงละครการทดสอบทางซีรั่ม
ปฏิกิริยานี้มีมากกว่าความไวมากกว่าก่อนหน้านี้ ใช้ในการวินิจฉัยโรคที่เกิดจากแบคทีเรีย ปรสิตภายในเซลล์ และโปรโตซัว มีความเฉพาะเจาะจงมากจนสามารถตรวจจับแอนติบอดีที่มีความเข้มข้นต่ำมาก

สำหรับการตั้งค่าจะใช้เนื้อแกะปอกเปลือก peelเซลล์เม็ดเลือดแดงของมนุษย์และเซลล์เม็ดเลือดแดงที่ปรับสภาพด้วยแอนติบอดีหรือแอนติเจน (ขึ้นอยู่กับสิ่งที่ช่างต้องการค้นหา) ในบางกรณี เซลล์เม็ดเลือดแดงของมนุษย์ได้รับการรักษาด้วยอิมมูโนโกลบูลิน ปฏิกิริยาทางซีรั่มวิทยาของเม็ดเลือดแดงถือว่าใช้ได้หากฝังไว้ที่ด้านล่างของหลอด ปฏิกิริยาเชิงบวกสามารถพูดได้เมื่อเซลล์ถูกจัดเรียงในรูปของร่มคว่ำซึ่งอยู่ด้านล่างทั้งหมด ปฏิกิริยาเชิงลบจะถูกนับถ้าเซลล์เม็ดเลือดแดงตกลงในคอลัมน์หรือในรูปแบบของปุ่มที่อยู่ตรงกลางด้านล่าง

ปฏิกิริยาการตกตะกอน (RP)

การตรวจเลือดทางซีรั่ม
การทดสอบทางซีรั่มประเภทนี้ใช้สำหรับ areการตรวจจับอนุภาคแอนติเจนที่มีขนาดเล็กมาก ตัวอย่างเช่น โปรตีน (หรือบางส่วนของพวกมัน) สารประกอบของโปรตีนที่มีไขมันหรือคาร์โบไฮเดรต ส่วนของแบคทีเรีย และสารพิษของพวกมัน

เซรั่มสำหรับปฏิกิริยาได้มาจากการติดเชื้อเทียมของสัตว์ มักเป็นกระต่าย วิธีนี้สามารถใช้เพื่อให้ได้เซรั่มที่ตกตะกอนอย่างแน่นอน การตั้งค่าของปฏิกิริยาการตกตะกอนในซีรัมจะคล้ายคลึงกันในกลไกการออกฤทธิ์กับปฏิกิริยาการเกาะติดกัน แอนติบอดีที่มีอยู่ในซีรัมรวมกับแอนติเจนในสารละลายคอลลอยด์ ทำให้เกิดโมเลกุลโปรตีนขนาดใหญ่ที่ฝากไว้ที่ด้านล่างของหลอดทดลองหรือบนสารตั้งต้น (เจล) วิธีนี้ถือว่ามีความเฉพาะเจาะจงสูงและสามารถตรวจจับสารได้ในปริมาณเล็กน้อย

ใช้ในการวินิจฉัยกาฬโรค ทูลาเรเมีย แอนแทรกซ์ เยื่อหุ้มสมองอักเสบ และโรคอื่นๆ นอกจากนี้เขายังมีส่วนร่วมในการตรวจทางนิติเวช

ปฏิกิริยาการตกตะกอนของเจล

ปฏิกิริยาทางซีรั่มอย่างง่าย
การทดสอบทางซีรั่มสามารถทำได้ไม่เพียงเท่านั้นในตัวกลางที่เป็นของเหลว แต่ยังอยู่ในเจลวุ้นด้วย นี้เรียกว่าวิธีการตกตะกอนแบบกระจาย ด้วยความช่วยเหลือของมันได้ทำการศึกษาองค์ประกอบของสารผสมแอนติเจนที่ซับซ้อน วิธีนี้อิงตามเคมีบำบัดของแอนติเจนต่อแอนติบอดีและในทางกลับกัน ในเจล พวกมันเคลื่อนที่เข้าหากันด้วยความเร็วที่ต่างกัน และพบกัน ก่อตัวเป็นเส้นตกตะกอน แต่ละบรรทัด - AG-AT หนึ่งชุด

ปฏิกิริยาการทำให้เป็นกลางของ exotoxin กับ antitoxin (RN)

เซรั่มต้านพิษสามารถทำให้เป็นกลางการกระทำของ exotoxin ที่ผลิตโดยจุลินทรีย์ ปฏิกิริยาทางซีรั่มเหล่านี้ขึ้นอยู่กับสิ่งนี้ จุลชีววิทยาใช้วิธีนี้ในการไตเตรทซีรั่ม สารพิษ และทอกซอยด์ ตลอดจนกำหนดกิจกรรมการรักษาของพวกมัน ความแรงของการทำให้เป็นกลางของสารพิษถูกกำหนดโดยหน่วยทั่วไป - AE

นอกจากนี้ ต้องขอบคุณปฏิกิริยานี้ หนึ่งสามารถกำหนดชนิดหรือชนิดของสารพิษ ใช้ในการวินิจฉัยโรคบาดทะยัก คอตีบ โบทูลิซึม การศึกษาสามารถทำได้ทั้ง "บนกระจก" และในเจล

ปฏิกิริยาสลาย (RL)

ปฏิกิริยาทางซีรั่มต่อซิฟิลิส
เซรั่มภูมิคุ้มกันที่เข้าสู่ร่างกายผู้ป่วยมีคุณสมบัตินอกเหนือจากหน้าที่หลักของภูมิคุ้มกันแบบพาสซีฟแล้วยังมีคุณสมบัติ lytic สามารถละลายสารจุลินทรีย์ สิ่งแปลกปลอมในเซลล์ และไวรัสที่เข้าสู่ร่างกายของผู้ป่วยได้ ขึ้นอยู่กับความจำเพาะของแอนติบอดีที่รวมอยู่ในซีรั่ม bacteriolysins, cytolysins, spirochetolysins, hemolysins และอื่น ๆ จะถูกแยกออก

แอนติบอดีจำเพาะเหล่านี้เรียกว่า"เสริม". พบในของเหลวในร่างกายเกือบทั้งหมด มีโครงสร้างโปรตีนที่ซับซ้อน และไวต่ออุณหภูมิที่เพิ่มขึ้น การสั่นไหว กรด และแสงแดดโดยตรง แต่ในสภาวะแห้ง มันสามารถคงคุณสมบัติ lytic ไว้ได้นานถึงหกเดือน

มีปฏิกิริยาทางซีรั่มประเภทนี้ประเภทนี้:

- การสลายตัวของแบคทีเรีย

- ภาวะเม็ดเลือดแดงแตก

สลายแบคทีเรียโดยใช้ซีรัมในเลือดผู้ป่วยและเซรั่มภูมิคุ้มกันจำเพาะที่มีจุลินทรีย์มีชีวิต หากมีสารเติมเต็มในเลือดเพียงพอ ผู้วิจัยจะเห็นการสลายของแบคทีเรีย และปฏิกิริยาจะถือเป็นบวก

ปฏิกิริยาทางซีรั่มที่สองของเลือดคือความจริงที่ว่าการระงับเม็ดเลือดแดงของผู้ป่วยได้รับการรักษาด้วยซีรั่มที่มี hemolysins ซึ่งเปิดใช้งานเฉพาะเมื่อมีคำชมเชยเท่านั้น หากมี ผู้ช่วยห้องปฏิบัติการจะสังเกตการละลายของเซลล์เม็ดเลือดแดง ปฏิกิริยานี้ใช้กันอย่างแพร่หลายในยาแผนปัจจุบันเพื่อกำหนดระดับของส่วนประกอบ (นั่นคือปริมาณที่น้อยที่สุดที่กระตุ้นการสลายของเม็ดเลือดแดง) ในซีรัมในเลือดและเพื่อทำการทดสอบการผูกมัด ด้วยวิธีนี้จะทำปฏิกิริยาทางซีรั่มสำหรับซิฟิลิส - ปฏิกิริยา Wasserman

ปฏิกิริยาการตรึงเสริม (CBC)

จุลชีววิทยาปฏิกิริยาทางซีรั่ม
ปฏิกิริยานี้ใช้เพื่อตรวจหาแอนติบอดีต่อสารติดเชื้อในซีรัมในเลือดของผู้ป่วย รวมทั้งเพื่อระบุเชื้อโรคด้วยโครงสร้างแอนติเจน

ถึงจุดนี้เราได้อธิบายง่ายๆปฏิกิริยาทางซีรั่ม CSC ถือเป็นปฏิกิริยาที่ซับซ้อน เนื่องจากไม่ใช่สององค์ประกอบ แต่มีองค์ประกอบสามอย่างที่โต้ตอบกัน: แอนติบอดี แอนติเจนและส่วนประกอบ สาระสำคัญของมันอยู่ในความจริงที่ว่าปฏิสัมพันธ์ระหว่างแอนติบอดีและแอนติเจนเกิดขึ้นเฉพาะเมื่อมีโปรตีนชมเชยซึ่งถูกดูดซับบนพื้นผิวของคอมเพล็กซ์ AG-AT ที่เกิดขึ้น

แอนติเจนเองหลังจากเติมสารเติมเต็มได้รับการเปลี่ยนแปลงที่สำคัญซึ่งแสดงคุณภาพของปฏิกิริยาที่ดำเนินการ มันสามารถเป็น lysis, hemolysis, immobilization, bactericidal หรือ bacteriostatic

ปฏิกิริยาจะเกิดขึ้นในสองขั้นตอน:

  1. การก่อตัวของแอนติเจนและแอนติบอดีที่ซับซ้อนซึ่งผู้วิจัยมองไม่เห็น
  2. แอนติเจนเปลี่ยนแปลงภายใต้อิทธิพลของส่วนประกอบระยะนี้มักจะติดตามได้ด้วยตาเปล่า หากมองไม่เห็นปฏิกิริยาด้วยสายตา ระบบจะใช้ระบบตัวบ่งชี้เพิ่มเติมเพื่อระบุการเปลี่ยนแปลง

ระบบอินดิเคเตอร์

ปฏิกิริยานี้ขึ้นอยู่กับการจับส่วนเติมเต็มเซลล์เม็ดเลือดแดง ram บริสุทธิ์และซีรัมที่ทำให้เม็ดเลือดแดงแตกซึ่งไม่มีส่วนประกอบเสริม จะถูกเติมลงในหลอดทดลองหนึ่งชั่วโมงหลังจากตั้งค่า RSC หากส่วนประกอบที่ไม่ผูกมัดยังคงอยู่ในหลอดทดลอง ส่วนประกอบดังกล่าวจะรวมเข้ากับสารเชิงซ้อน AG-AT ที่เกิดขึ้นระหว่างเซลล์เม็ดเลือดลูกแกะและฮีโมไลซินและทำให้เซลล์เหล่านี้ละลาย นี่จะหมายความว่า RSK เป็นค่าลบ หากเม็ดเลือดแดงยังคงไม่บุบสลาย ปฏิกิริยาจะเป็นบวก

ปฏิกิริยาฮีแมกกลูติเนชัน (HA)

การเกาะติดกันของปฏิกิริยาทางซีรั่ม
มีปฏิกิริยา hemagglutination ที่แตกต่างกันสองแบบโดยพื้นฐาน หนึ่งในนั้นคือเซรุ่มวิทยาใช้เพื่อกำหนดกลุ่มเลือด ในกรณีนี้ เซลล์เม็ดเลือดแดงจะมีปฏิกิริยากับแอนติบอดี

และปฏิกิริยาที่สองไม่ใช่ซีรัมวิทยาเมื่อเซลล์เม็ดเลือดแดงทำปฏิกิริยากับฮีแมกกลูตินินที่ผลิตโดยไวรัส เนื่องจากเชื้อโรคแต่ละตัวจะทำหน้าที่เฉพาะกับเซลล์เม็ดเลือดแดงที่จำเพาะ (ไก่ เนื้อแกะ ลิง) ปฏิกิริยานี้จึงถือว่ามีความเฉพาะเจาะจงสูง

เข้าใจคิดบวกหรือลบเป็นไปได้โดยตำแหน่งของเซลล์เม็ดเลือดที่ด้านล่างของหลอดทดลอง หากรูปแบบของมันคล้ายกับร่มกลับหัว แสดงว่าไวรัสที่ต้องการนั้นมีอยู่ในเลือดของผู้ป่วย และถ้าเม็ดเลือดแดงทั้งหมดก่อตัวเป็นคอลัมน์เหรียญ ก็ไม่มีเชื้อโรคที่แสวงหา

ปฏิกิริยาการยับยั้งฮีแมกกลูติเนชัน (RTGA)

นี่เป็นปฏิกิริยาที่จำเพาะเจาะจงมาก ซึ่งช่วยให้คุณกำหนดชนิด ชนิดของไวรัส หรือการมีอยู่ของแอนติบอดีจำเพาะในซีรัมในเลือดของผู้ป่วย

สาระสำคัญของมันอยู่ในความจริงที่ว่าแอนติบอดีเพิ่มวัสดุทดสอบลงในหลอดทดลอง เพื่อป้องกันการสะสมของแอนติเจนบนเม็ดเลือดแดง จึงหยุดการเกิด hemagglutination นี่เป็นสัญญาณเชิงคุณภาพของการมีแอนติเจนที่จำเพาะในเลือดสำหรับไวรัสเป้าหมายที่เฉพาะเจาะจง

ปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ (RIF)

ปฏิกิริยาทางซีรั่มของเม็ดเลือดแดง
ปฏิกิริยาขึ้นอยู่กับความสามารถในการระบุคอมเพล็กซ์ AG-AT ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงหลังการรักษาด้วยสีย้อมฟลูออโรโครม วิธีนี้ใช้งานง่าย ไม่ต้องการการแยกจากวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ และใช้เวลาเพียงเล็กน้อย จำเป็นสำหรับการวินิจฉัยโรคติดเชื้ออย่างเร่งด่วน

ในทางปฏิบัติ ปฏิกิริยาทางซีรั่มเหล่านี้แบ่งออกเป็นสองประเภท: ทางตรงและทางอ้อม

RIF โดยตรงผลิตขึ้นด้วยแอนติเจนที่ก่อนการรักษาด้วยเซรั่มเรืองแสง และทางอ้อม ยาจะได้รับการบำบัดด้วยชุดตรวจวินิจฉัยทั่วไปที่มีแอนติเจนต่อแอนติบอดีที่ต้องการก่อน จากนั้นจึงนำเซรั่มเรืองแสงซึ่งจำเพาะต่อโปรตีนของคอมเพล็กซ์ AG-AT กลับมาใช้อีกครั้ง และเซลล์จุลินทรีย์จะมองเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์