De term "microscopie" heeft Griekse wortels. Vertaald betekent het de studie van objecten met behulp van zeer nauwkeurige instrumenten. Onlangs is het steeds populairder geworden luminescentie en elektronenmicroscopie.
Resolutie
In de regel wordt het als het minimum opgevatde afstand waarop duidelijk zichtbare objecten kunnen zijn. De mate van penetratie in de microscopische wereld, het vermogen om rekening te houden met de grootte van het onderzochte element, hangt af van de resolutie van de apparatuur. Bij sterke vergroting kunnen objectgrenzen samenvloeien. Dienovereenkomstig zijn er bepaalde grenzen waarbuiten de benadering van de elementen zinloos is.
Fluorescentiemicroscopiemethode: mechanisme
Bij het omzetten van de energie die het opneemtstof, in zichtbare straling treedt gloed op. Het heet luminescentie. Dit fenomeen is te wijten aan het feit dat sommige stoffen, wanneer ze aan licht worden blootgesteld, stralen beginnen uit te zenden met een andere (meestal lange) golflengte. Bovendien veranderen sommige objecten die onder normale belichting een bepaalde kleur hebben van kleur onder invloed van ultraviolette straling.
specificiteit
Een object dat niet kan worden gezien in ultraviolet lichtlicht kan een heldere glans uitstralen als het wordt behandeld met een speciale substantie. Daarin gloeien de elementen in verschillende kleuren in het donker. De sterkte van de straling varieert, maar is meestal klein. In dit opzicht is fluorescentiemicroscopie effectief in een verduisterde kamer. Bij dit soort onderzoek wordt het object bekeken in het licht dat het zelf uitstraalt. De chemische samenstelling van weefsels en cellen zal de kwaliteit van het onderzoek beïnvloeden. Luminescentiemicroscopie wordt tot op zekere hoogte beschouwd als een histochemisch onderzoek.
classificatie
Luminescentiemicroscopie kan primair of secundair zijn. In het laatste geval wordt het object bewerkt met speciale compounds die een glans geven. Primair fluorescentiemicroscopie is gebaseerd op het intrinsieke vermogen van het onderzochte element om licht uit te stralen.
uitrusting
Fluorescentiemicroscopie wordt uitgevoerd metmet behulp van verschillende apparaten. Hun belangrijkste element is de illuminator. Het is uitgerust met een UV-lamp. Bovendien gebruiken de apparaten een set filters. Bij sommige apparaten zijn er nogal wat in verschillende configuraties. Afhankelijk van de kleur die wordt gebruikt om luminescentie op te wekken - ultraviolet of blauw, wordt een geschikt filter tussen de lichtbron en het te bestuderen object geplaatst. Omdat de gloed van een microscopisch element energetisch zwakker is dan het opwindende licht, wordt deze slechts onder één voorwaarde opgevangen. Overtollige stralen afkomstig van de bron moeten worden afgesneden door een geelgroen filter. Het wordt op het oculair van het instrument geplaatst. Het meest uitgesproken luminescentie-effect zal zijn wanneer het filter de stralen die uit de lichtbron komen volledig afsnijdt.
Waaruit bestaat een zichtbare lichtinstallatie?Het bevat een heldere lichtbron en een biologische microscoop. Een blauwviolet filter is geïnstalleerd tussen de spiegel van het apparaat en de lamp. Dit kan FS-1, UFS-3, enzovoort zijn. Het gele filter past over het oculair van de microscoop. Met hun hulp valt blauwviolet licht op het object. Het wekt ook luminescentie op. Maar dit licht kan het zien van de gloed verstoren. Daarom wordt het op weg naar het oog afgesneden door een geel filter. De verlichting is geïnstalleerd volgens de Koehler-methode, met één uitzondering. Het condensormembraan moet volledig open zijn. Het is belangrijk om bij het testen een niet-fluorescerende immersie-olie te gebruiken. Om zijn eigen glans te verminderen, wordt er nitrobenzeen aan toegevoegd (2-10 druppels / 1 g).
Luminescentiemicroscopie: toepassingen in de microbiologie
De voordelen van dit soort onderzoek zijn:
- De mogelijkheid om kleurenafbeeldingen te verkrijgen.
- Hoog contrastniveau van zelfemitterende elementen tegen een zwarte achtergrond.
- Detectie en lokalisatie van bepaalde soorten virussen en microben.
- Het vermogen om transparante en niet-transparante levende organismen te bestuderen.
- Studie van levensprocessen in hun dynamiek.
Het moet ook gezegd worden dat luminescentiemicroscopie bijdraagt aan de ontwikkeling van de beste methoden van histochemie en cytochemie, snelle diagnostiek.
