Pravila za određivanje krvne grupe prema ABO sustavu

Postupak za određivanje krvnih grupa prema ABO sustavusastoji se u otkrivanju antigena A i B u crvenim krvnim stanicama pomoću standardnih antitijela i upotrebe aglutinina u plazmi ili u serumu analizirane krvi sa standardnim crvenim krvnim stanicama. Tehnika je razvijena početkom 20. stoljeća i još uvijek se aktivno koristi u medicini. Određivanje antigena A i B provodi se zahvaljujući anti-A i anti-B ciklonama.

Osnovni pojmovi

Donatori uvijek određuju ne samo antigeneu crvenim krvnim stanicama, ali i aglutinini u serumu (plazmi) koristeći standardne crvene krvne stanice. Venska krv koristi se kao biomaterijal. Prije ispitivanja morate odustati od masne hrane dan prije analize i ne pušiti pola sata prije testa. Krvne grupe određuju se dva puta: najprije u medicinskom odjeljenju, gdje se materijal nabavlja, a zatim potvrđuje studijom u laboratoriju.

Određivanje krvnih grupa prema ABO sustavu jeGlavni test koji se koristi u transfuziologiji. Također, neke životinje imaju sličan sustav krvnih grupa, poput čimpanza, gorila i bonoba.

Povijest otkrića

В науке существует общепринятое мнение о том, что metodologiju određivanja krvnih grupa prema ABO sustavu prvi je put otkrio Karl Landsteiner, austrijski znanstvenik, 1900. godine. Tada je u svom radu opisao tri vrste antigena. Za to je trideset godina kasnije dobio Nobelovu nagradu za medicinu ili fiziologiju. Zbog činjenice da ranije nisu postojale bliske veze između znanstvenika, kasnije je utvrđeno da je češki serolog Jan Jansky, bez obzira na istraživanje K. Landsteiner, prvo opisao četiri krvne grupe ljudi, ali njegove studije nisu bile poznate širokoj publici. Trenutno se radi o klasifikaciji koju je razvio Y. Yansky i koja se koristi u Rusiji i republikama bivšeg SSSR-a. U SAD-u W. L. Moss stvorio je svoje slično djelo 1910. godine.

Metode za određivanje krvnih grupa prema ABO sustavu pomoću ciklona

Krvnu skupinu treba utvrditi u zatvorenom prostorudobro osvjetljenje u skladu s temperaturnim rasponom od 15 do 25 stupnjeva Celzija, jer odstupanja od ove norme mogu utjecati na rezultate studije. Inicijali i prezime pacijenta napisani su na tanjuru ili tanjuru. S lijeva na desno ili u krug primjenjuju se standardne oznake skupina (O (I), A (II), B (III)). Pod njih se kap po kap stavljaju odgovarajući serumi sa zasebnim pipetama za svaku vrstu. Tada im se dodaje pacijentova krv. Materijal za istraživanje uzima se iz ušne školjke ili prsta. Ovo zahtijeva tehniku ​​za određivanje krvne grupe prema ABO sustavu.

Upotreba crvenih krvnih zrnaca je također zakonita,in vitro nakon stvaranja ugruška. Potrebno je da količina seruma bude veća od količine krvi dodate deset puta. Nakon toga, kapi se miješaju sa staklenim štapićima (odvojeno za svaki). Pet minuta, lagano protresući tanjur, pazite na pojavu reakcije hemaglutinacije. Nalazi se u činjenici da se pojavljuju male crvene grudice, a zatim se spajaju u veće. Serum u ovom trenutku gotovo potpuno izgubi boju.

Kako bi se uklonila lažna hemaglutinacijajednostavnim lijepljenjem crvenih krvnih zrnaca, nakon tri minute trebate dodati jednu kap fiziološke otopine i provjeriti postoji li aglutinacija. Ako je tako, onda je to istina. To je sve, određivanje krvnih grupa prema ABO sustavu sada je završeno.

Tumačenje rezultata

Kao rezultat, mogu se promatrati četiri reakcije:

• aglutinacija se ne događa ni s jednim serumom - prvom skupinom O (I);
• reakcija se očitovala serumima I (ab) i III (a) - drugom skupinom A (II);
• aglutinacija se događa sa serumima I (ab) i II (b) - trećom skupinom B (III);
• ako se reakcija dogodi sa tri seruma,mora se provesti dodatni postupak sa reagentima grupe AB (IV), koji su standardni; ako u takvom padu nema aglutinacije, možemo pretpostaviti da je ovo četvrta krvna grupa AB (IV).

Ekspresna metoda za Rh faktor

Metodologija određivanja krvnih grupa prema ABO sustavu uključuje istodobnu identifikaciju Rh faktora (Rh).

Поверхность пластинки предварительно смачивают и na njemu napisati "kontrolni serum" i "serum antiresus". Potom se ispod natpisa stavi jedna ili dvije kapi potrebnih reagensa i doda se analizirani materijal. Za to možete koristiti i krv iz prsta (u istoj količini kao i volumen seruma) ili crvene krvne stanice koje ostaju na dnu epruvete nakon pojave ugruška (polovica volumena seruma). Izbor materijala ne utječe na konačni rezultat. Potom se krv i serum miješaju sa suhom staklenom šipkom, nakon čega se očekuje reakcija pet minuta. Kako biste uklonili lažna očitanja, nakon tri do četiri minute dodajte izotoničnu otopinu natrijevog klorida (samo nekoliko kapi). Određivanje krvne grupe prema ABO i Rh sustavu provodi se vrlo često.

Ako je aglutinacija crvenih krvnih stanica u kapi sjavlja se serum, to ukazuje na pozitivnu rezusnu krv. Prema statistikama, Rh + se nalazi u 85% svjetske populacije. Njegova odsutnost omogućava nam da razgovaramo o Rh negativnoj pripadnosti. Ako se aglutinacija pojavila u kontrolnom serumu, tada je postala neupotrebljiva. Nažalost, algoritam za određivanje krvne grupe prema ABO sustavu ne radi uvijek savršeno.

Koje se pogreške mogu učiniti s ovom tehnikom?

Nepreciznosti u određivanju krvi koja pripada određenoj skupini ovise o sljedećim razlozima:

• Tehnička.
• Biološka specifičnost proučavane krvi.
• Neispravan karakter standardnih seruma i crvenih krvnih zrnaca.

Tehničke pogreške

Moguće pogreške u unakrsnom određivanju krvne grupe ABO sustava:

• Nepravilno smještena serumska ploča.
• Netočne kvantitativne proporcije građe.
• Korištenje nedovoljno čistih ploča iliploče koje dolaze u kontakt s krvlju (svaki serum treba prikupiti zasebnom pipetom, isprati otopinom natrijevog klorida (u koncentraciji od 0,9%)).
• Netočan zapis analiziranog materijala.
• Nepoštivanje vremena potrebnog započetak aglutinacije - ne biste trebali žuriti i uzimati u obzir reakciju prije nego što je prošlo pet minuta, jer u krvi može doći do slabih aglutinogena. Prekomjerna ekspozicija također ne vrijedi, jer se kapi mogu osušiti s rubova i dovesti do lažnog zaključka. Važno je slijediti pravila za određivanje krvne grupe prema ABO sustavu.
  
• Pogrešno centrifugiranje također može dovesti do lažnog rezultata.
• Previsoka temperatura zrakautječe na odsutnost aglutinacije. Da biste izbjegli takve pogreške, morate koristiti poseban serum dizajniran za rad u vrućim klimama. Na tanjuru ili tanjuru potrebno je odrediti krvne grupe, čija vanjska površina pada u hladnu vodu.

Specifične biološke pogreške

Pogreške povezane s biološkom specifičnošću analizirane krvi dijele se u dvije vrste.

• Ovisno o karakteristikama crvenih krvnih zrnaca.
• Pogreške zbog bioloških karakteristika seruma.

Razmotrite svaki pogled detaljnije.

Ovisno o crvenim krvnim stanicama

• Поздняя агглютинация, объясняющаяся «слабыми» oblici crvenih krvnih stanica i antigeni. Da bi se izbjegle pogreške, potrebno je utvrditi krvnu skupinu davatelja i primatelja pomoću standardnih crvenih krvnih stanica. Prepoznajte aglutinogen A₂ treba preispitati s drugim vrstama reagensa i drugih jela, povećavajući vrijeme registracije reakcije.
• Panaglutinacija (autoaglutinacija) - vještinakrv pokazuje istu reakciju nespecifične prirode sa svim serumima, uključujući i njihov vlastiti. Nakon pet minuta, ozbiljnost takve aglutinacije slabi, iako bi se trebala povećati. Slični slučajevi zabilježeni su kod oboljelih od raka, spaljenih itd. Kao kontrolu, potrebno je procijeniti manifestaciju aglutinacije analiziranih crvenih krvnih stanica u standardnom serumu četvrte skupine i fiziološkoj fiziološkoj otopini. Kada se utvrdi "panaglutinacija", krvna grupa rezultat je trostrukog pranja crvenih krvnih stanica. Ako ne daje željeni rezultat, vrijedno je ponovno uzeti uzorak krvi u epruvetu, zagrijanu prije postupka, i uzorak staviti u termalni spremnik kako bi se održala temperatura od 37 stupnjeva Celzijevih i više. Potom je treba dostaviti u laboratorij, gdje se čuva gornja temperatura i upotrebljavati grijanu fiziološku otopinu, ploču i reagense.

• Ponekad crvene krvne stanice analizirane krviraspoređeni su u obliku "stupova kovanica" i mogu se pogrešno smatrati aglutinate. Ako dodate dvije kapi izotonične otopine i nježno protresite tabletu, crvena krvna zrnca su u pravom položaju.
• Nepotpuna ili mješovita aglutinacija, koja se javlja kod bolesnika s drugom, trećom i četvrtom skupinom kao rezultat transplantacije koštane srži ili u prva tri mjeseca nakon transfuzije krvi 0 (I).

Zbog bioloških karakteristika seruma

• Kao rezultat rutinskog testiranjaprethodna senzibilizacija otkrila su antitijela različite specifičnosti. Potrebno ga je utvrditi i odabrati crvene krvne stanice bez antigena na koji je otkrivena imunizacija. Primatelj mora nužno pojedinačno odabrati kompatibilnu krv davatelja.
• Nema protutijela A i B, što se opaža kod novorođenčadi i pacijenata koji pate od inhibicije humoralnog imuniteta.
• Uz formiranje "kovanica novčića" nenormalnorezultat se mora potvrditi uzimanjem standardnih crvenih krvnih zrnaca prve skupine. Otopina natrijevog klorida i ljuljanje tableta pomažu u razlikovanju ovih aglutinata i „stupova kovanica“.
  

Pogreške povezane s uporabom neispravnih standardnih crvenih krvnih stanica i seruma

Slabi serumi s prošlim trajanjem ili s titrom manjim od 1:32 mogu stvoriti slabu i kasnu aglutinaciju. Uporaba takvih reagensa je neprihvatljiva.

Korištenje neispravnih standardnih crvenih krvnih stanicaili serumi pripremljeni u nesterilnim uvjetima i nedovoljno konzervirani, dovode do pojave "bakterijske" aglutinacije koja je nespecifične prirode.

Существует множество популярных предположений о krvne grupe ABO sustava, koja se pojavila odmah nakon njegovog otkrića u različitim svjetskim kulturama. Tako je, na primjer, u 30-im godinama prošlog stoljeća u Japanu i nekim drugim zemljama popularnost stekla teorija koja je krvnu skupinu povezala s određenom vrstom ličnosti. Slične su teorije popularne i danas.

Također postoji mišljenje da je osoba s grupom A osjetljiva na teške mamurluke, O je povezan s dobrim zubima, a skupina A2 s najvišom razinom IQ-a. Ali znanstveno takve tvrdnje nisu dokazane.

Ispitali smo određivanje krvnih grupa prema ABO sustavu pomoću standardnih seruma.