Pojam "mikroskopija" ima grčke korijene. U prijevodu to znači proučavanje predmeta pomoću visoko preciznih instrumenata. U posljednje vrijeme postaje sve popularniji fluorescentna i elektronska mikroskopija.
Razlučivost
U pravilu se podrazumijeva kao minimumudaljenost na kojoj se mogu jasno razlikovati objekti. Stupanj prodiranja u mikroskopski svijet, sposobnost razmatranja veličine ispitivanog elementa ovisit će o razlučivosti opreme. Pri velikom uvećanju, granice predmeta mogu se spojiti. Sukladno tome, postoje određene granice izvan kojih je aproksimacija elemenata besmislena.
Metoda fluorescentne mikroskopije: Mehanizam
Pri pretvaranju energije koju upijatvari, u vidljivom zračenju dolazi do sjaja. Zove se luminiscencija. Ova pojava nastaje zbog činjenice da neke tvari pod utjecajem svjetlosti počinju emitirati zrake s različitom (obično dugom) valnom duljinom. Osim toga, neki predmeti koji imaju određenu boju pri normalnom osvjetljenju mijenjaju boju pod utjecajem ultraljubičastog zračenja.
specifičnost
Predmet koji se ne može vidjeti u ultraljubičastom svjetlusvjetlost, može emitirati sjajan sjaj ako se tretira posebnom tvari. U njemu elementi svijetle u različitim bojama u mraku. Jačina zračenja je različita, ali obično je mala. S tim u vezi, fluorescentna mikroskopija je učinkovita u zamračenoj sobi. Kad se koristi ova vrsta istraživanja, objekt se promatra u svjetlu koje sam emitira. Kemijski sastav tkiva i stanica utjecati će na kvalitetu studije. Luminescentna mikroskopija u određenoj se mjeri smatra histokemijskim ispitivanjem.
klasifikacija
Luminescentna mikroskopija mogu biti primarne ili sekundarne. U potonjem slučaju, predmet se obrađuje posebnim spojevima koji daju sjaj. Primarni fluorescentna mikroskopija temelji se na unutarnjoj sposobnosti ispitivanog elementa da emitira svjetlost.
oprema
Fluorescentna mikroskopija se izvodi sakoristeći razne uređaje. Osvjetljivač djeluje kao njihov glavni element. Opremljen je UV lampom. Uz to, uređaji koriste skup filtara. U nekim uređajima ima ih poprilično u različitim konfiguracijama. Ovisno o tome koja se boja koristi za pobuđivanje luminiscencije - ultraljubičasta ili plava, između izvora svjetlosti i predmeta koji se proučava postavlja se odgovarajući filtar. Budući da je sjaj mikroskopskog elementa energetski slabiji od uzbudljive svjetlosti, bit će zabilježen samo pod jednim uvjetom. Suvišak zraka koji potječu iz izvora mora biti odsječen žuto-zelenim filtrom. Postavlja se na okular instrumenta. Najizraženiji učinak luminiscencije bit će kada filtar potpuno odsiječe zrake koje proizlaze iz izvora svjetlosti.
Od čega se sastoji instalacija vidljivog svjetla?Sadrži svijetli izvor svjetlosti i biološki mikroskop. Između zrcala uređaja i svjetiljke ugrađen je plavoljubičasti filtar. To može biti FS-1, UFS-3 i tako dalje. Žuti filtar staje preko okulara mikroskopa. Uz njihovu pomoć na objekt pada plavoljubičasta svjetlost. Također pobuđuje luminiscenciju. Ali ovo svjetlo može ometati gledanje sjaja. Stoga je na putu do oka odsječen žutim filtrom. Postavljanje rasvjete vrši se prema Koehlerovoj metodi, uz jednu iznimku. Dijafragma kondenzatora mora biti potpuno otvorena. Važno je koristiti ne-fluorescentno uronjeno ulje za istraživanje. Da bi smanjio vlastiti sjaj, dodaje mu se nitrobenzen (2-10 kapi / 1 g).
Luminescentna mikroskopija: primjene u mikrobiologiji
Prednosti ove vrste istraživanja su:
- Mogućnost dobivanja slika u boji.
- Visoka razina kontrasta samoemitirajućih elemenata na crnoj pozadini.
- Otkrivanje i lokalizacija određenih vrsta virusa i mikroba.
- Sposobnost proučavanja prozirnih i neprozirnih živih organizama.
- Proučavanje životnih procesa u njihovoj dinamici.
Također se mora reći da luminiscentna mikroskopija doprinosi razvoju najfinijih metoda histo- i citokemije, ekspresne dijagnostike.
