Der Begriff "Mikroskopie" hat griechische Wurzeln. Übersetzt bedeutet dies das Studium von Objekten mit hochpräzisen Instrumenten. In letzter Zeit ist es immer beliebter geworden Fluoreszenz- und Elektronenmikroskopie.
Auflösung
In der Regel wird es als Minimum verstandendie Entfernung, in der deutlich sichtbare Objekte sein können. Der Grad des Eindringens in die mikroskopische Welt und die Fähigkeit, die Größe des untersuchten Elements zu berücksichtigen, hängen von der Auflösung des Geräts ab. Bei hoher Vergrößerung können Objektgrenzen zusammengeführt werden. Dementsprechend gibt es bestimmte Grenzen, ab denen die Annäherung der Elemente bedeutungslos ist.
Fluoreszenzmikroskopie-Methode: Mechanismus
Bei der Umwandlung der Energie, die es absorbiertSubstanz, in sichtbarer Strahlung tritt Glühen auf. Es heißt Lumineszenz. Dieses Phänomen ist darauf zurückzuführen, dass einige Substanzen unter dem Einfluss von Licht Strahlen mit einer anderen (normalerweise langen) Wellenlänge emittieren. Darüber hinaus ändern einige Objekte, die bei normaler Beleuchtung eine bestimmte Farbe haben, ihre Farbe unter dem Einfluss ultravioletter Strahlung.
Spezifität
Ein Objekt, das im ultravioletten Bereich nicht zu sehen istLicht, kann einen hellen Glanz abgeben, wenn es mit einer speziellen Substanz behandelt wird. Darin leuchten die Elemente im Dunkeln in verschiedenen Farben. Die Stärke der Strahlung variiert, ist aber normalerweise gering. In dieser Hinsicht ist die Fluoreszenzmikroskopie in einem abgedunkelten Raum wirksam. Bei dieser Art der Forschung wird das Objekt in dem Licht betrachtet, das es selbst aussendet. Die chemische Zusammensetzung von Geweben und Zellen beeinflusst die Qualität der Studie. Die Lumineszenzmikroskopie wird bis zu einem gewissen Grad als histochemische Untersuchung angesehen.
Klassifizierung
Lumineszenzmikroskopie kann primär oder sekundär sein. Im letzteren Fall wird das Objekt mit speziellen Verbindungen bearbeitet, die einen Glanz verleihen. Primär Fluoreszenzmikroskopie basiert auf der intrinsischen Fähigkeit des untersuchten Elements, Licht zu emittieren.
Ausrüstung
Fluoreszenzmikroskopie wird mit durchgeführtmit einer Vielzahl von Geräten. Der Illuminator fungiert als Hauptelement. Es ist mit einer UV-Lampe ausgestattet. Darüber hinaus verwenden die Geräte eine Reihe von Filtern. In einigen Geräten gibt es ziemlich viele davon in unterschiedlichen Konfigurationen. Je nachdem, welche Farbe zur Anregung der Lumineszenz verwendet wird - ultraviolett oder blau - wird ein geeigneter Filter zwischen der Lichtquelle und dem zu untersuchenden Objekt platziert. Da die Lumineszenz des mikroskopischen Elements energetisch schwächer ist als das anregende Licht, wird es nur unter einer Bedingung erfasst. Überschüssige Strahlen, die von der Quelle ausgehen, müssen durch einen gelbgrünen Filter abgeschnitten werden. Es wird auf das Okular des Instruments gelegt. Der Lumineszenzeffekt ist am stärksten ausgeprägt, wenn der Filter die von der Lichtquelle ausgehenden Strahlen vollständig abschneidet.
Woraus besteht eine Installation mit sichtbarem Licht? Es enthält eine helle Lichtquelle und ein biologisches Mikroskop. Zwischen dem Spiegel des Geräts und der Lampe ist ein blau-violetter Filter installiert. Dies kann FS-1, UFS-3 usw. sein. Der gelbe Filter passt über das Okular des Mikroskops. Mit ihrer Hilfe fällt blau-violettes Licht auf das Objekt. Es regt auch die Lumineszenz an. Dieses Licht kann jedoch das Sehen des Glühens beeinträchtigen. Auf dem Weg zum Auge wird es daher von einem gelben Filter abgeschnitten. Die Beleuchtungsinstallation erfolgt mit einer Ausnahme nach der Koehler-Methode. Die Kondensatormembran muss vollständig geöffnet sein. Es ist wichtig, beim Testen ein nicht fluoreszierendes Immersionsöl zu verwenden. Um das eigene Leuchten zu verringern, wird Nitrobenzol hinzugefügt (2-10 Tropfen / 1 g).
Lumineszenzmikroskopie: Anwendungen in der Mikrobiologie
Die Vorteile dieser Art von Forschung sind:
- Die Fähigkeit, Farbbilder zu erhalten.
- Hoher Kontrast von selbstemittierenden Elementen vor einem schwarzen Hintergrund.
- Erkennung und Lokalisierung bestimmter Arten von Viren und Mikroben.
- Die Fähigkeit, transparente und nicht transparente lebende Organismen zu untersuchen.
- Untersuchung von Lebensprozessen in ihrer Dynamik.
Es muss auch gesagt werden, dass die Lumineszenzmikroskopie zur Entwicklung der besten Methoden der Histochemie und Zytochemie, der Expressdiagnostik, beiträgt.
