إجراء تحديد فصائل الدم وفقًا لنظام ABOيتكون في الكشف عن المستضدات A و B في كريات الدم الحمراء باستخدام الأجسام المضادة القياسية واستخدام agglutinins في البلازما أو مصل الدم الذي تم تحليله بواسطة كريات الدم الحمراء القياسية. تم تطوير هذه التقنية في بداية القرن العشرين وما زالت تستخدم بنشاط في الطب. يتم تحديد المستضدات A و B بفضل مضادات A و B tsoliclones.
المفاهيم الأساسية
لا يتم تحديد المستضدات دائمًا من الجهات المانحةفي كريات الدم الحمراء ، ولكن أيضًا الراصات في مصل الدم (البلازما) باستخدام كريات الدم الحمراء القياسية. يستخدم الدم الوريدي كمادة حيوية. قبل الدراسة من الضروري الإقلاع عن الأطعمة الدهنية قبل يوم من التحليل وعدم التدخين قبل نصف ساعة من إجراء الاختبار. يتم تحديد فصائل الدم مرتين: أولاً في القسم الطبي حيث يتم شراء المادة ، ثم يتم تأكيدها عن طريق البحث في المختبر.
تحديد فصائل الدم وفقًا لنظام ABO هوالاختبار الرئيسي المستخدم في نقل الدم. تمتلك بعض الحيوانات أيضًا نظام فصيلة دم مماثل ، مثل الشمبانزي والغوريلا والبونوبو.
تاريخ الاكتشاف
هناك رأي مقبول بشكل عام في العلمتم اكتشاف طريقة تحديد فصائل الدم وفقًا لنظام ABO لأول مرة بواسطة العالم النمساوي كارل لاندشتاينر في عام 1900. ثم وصف في عمله ثلاثة أنواع من المستضدات. لهذا ، بعد ثلاثين عامًا ، حصل على جائزة نوبل في الطب وعلم وظائف الأعضاء. نظرًا لعدم وجود روابط وثيقة بين العلماء من قبل ، فقد ثبت لاحقًا أن عالم الأمصال التشيكي يان جانسكي ، بغض النظر عن بحث K. في الوقت الحاضر ، التصنيف الذي طوره Y. Jansky المستخدم في روسيا وجمهوريات الاتحاد السوفيتي السابق. في الولايات المتحدة ، ابتكر WL Moss عملاً مماثلاً في عام 1910.
طريقة تحديد فصائل الدم وفقًا لنظام ABO باستخدام tsoliclones
يجب تحديد فصيلة الدم في غرفة بهاإضاءة جيدة مع الحفاظ على درجة حرارة تتراوح من 15 إلى 25 درجة مئوية ، حيث قد يؤثر الانحراف عن هذا المعيار على نتائج الاختبار. تتم كتابة الأحرف الأولى من اسم المريض ولقبه على اللوحة أو اللوحة. من اليسار إلى اليمين أو في دائرة ، يتم تطبيق التعيينات القياسية للمجموعات (O (I) ، A (II) ، B (III)). تحتها ، يتم وضع المصل المقابل قطرة تلو الأخرى مع ماصات منفصلة لكل نوع. ثم يضاف لهم دم المريض. مادة البحث مأخوذة من شحمة الأذن أو الإصبع. هذا مطلوب من خلال تقنية تحديد فصيلة الدم وفقًا لنظام ABO.
من القانوني أيضًا استخدام خلايا الدم الحمراء ،في أنبوب الاختبار بعد تشكل الجلطة. من الضروري أن تكون كمية المصل عشرة أضعاف كمية الدم المضاف. بعد ذلك ، يتم خلط القطرات بقضبان زجاجية (لكل منها على حدة). في غضون خمس دقائق ، هز اللوحة برفق ، راقب ظهور تفاعل التراص الدموي. وجد في حقيقة ظهور كتل حمراء صغيرة ، ثم تندمج في كتل أكبر. في هذا الوقت ، يفقد المصل لونه تقريبًا.
من أجل القضاء على التراص الدموي الكاذبلصق بسيط لكريات الدم الحمراء ، تحتاج إلى إضافة قطرة واحدة من محلول ملحي بعد ثلاث دقائق والتحقق من استمرار التراص. إذا كان الأمر كذلك ، فهذا صحيح. هذا كل شيء ، لقد اكتمل الآن تعريف فصائل الدم وفقًا لنظام ABO.
تفسير النتائج
نتيجة لذلك ، يمكن ملاحظة أربعة ردود فعل:
- لا يحدث تراص مع أي من الأمصال - المجموعة الأولى هي O (I) ؛
- تجلى التفاعل مع الأمصال I (ab) و III (a) - المجموعة الثانية A (II) ؛
- يحدث التراص مع الأمصال I (ab) و II (b) - المجموعة الثالثة B (III) ؛
- إذا حدث التفاعل مع ثلاثة أمصال ،من الضروري تنفيذ إجراء إضافي باستخدام كواشف المجموعة AB (IV) القياسية ؛ إذا لم يكن هناك تراص في مثل هذا القطرة ، فيمكننا افتراض أن هذه هي فصيلة الدم الرابعة AB (IV).
الطريقة السريعة لعامل Rh
تتضمن طريقة تحديد فصائل الدم وفقًا لنظام ABO التحديد المتزامن لعامل Rh (Rh).
سطح اللوحة مبلل مسبقًا واكتب "مصل التحكم" و "مصل مضاد للريسوس" عليه. ثم توضع نقطة أو قطرتان من الكواشف المطلوبة تحت النقوش وتضاف إليها المادة التي تم تحليلها. للقيام بذلك ، يمكنك أيضًا استخدام الدم من الإصبع (بنفس كمية حجم المصل) أو خلايا الدم الحمراء المتبقية في أسفل الأنبوب بعد ظهور الجلطة (نصف حجم المصل). لا يؤثر اختيار المواد على النتيجة النهائية. ثم يتم خلط الدم والمصل بقضيب زجاجي جاف ، وبعد ذلك يتوقع التفاعل لمدة خمس دقائق. من أجل القضاء على القراءات الخاطئة ، يضاف محلول كلوريد الصوديوم متساوي التوتر بعد ثلاث إلى أربع دقائق (بضع قطرات فقط). يتم تحديد فصيلة الدم وفقًا لنظام ABO و Rh كثيرًا.
إذا كان تراص كرات الدم الحمراء في قطرة معيحدث المصل ، وهذا يشير إلى دم إيجابي. وفقًا للإحصاءات ، يوجد Rh + في 85 ٪ من سكان العالم. يسمح لنا غيابه بالحديث عن الانتماء السلبي Rh. إذا ظهر تراص في مصل التحكم ، فقد أصبح غير صالح للاستعمال. لسوء الحظ ، لا تعمل خوارزمية تحديد فصيلة الدم ABO دائمًا بشكل مثالي.
ما هي الأخطاء التي يمكن ارتكابها بهذه التقنية؟
تعتمد عدم الدقة في تحديد انتماء الدم إلى مجموعة معينة على الأسباب التالية:
- اصطلاحي.
- الخصوصية البيولوجية للدم قيد الدراسة.
- الطابع المعيب للمصل وكريات الدم الحمراء المعيارية.
أخطاء فنية
الأخطاء المحتملة في تحديد فصيلة الدم لنظام ABO بطريقة متقاطعة:
- وضع المصل في غير مكانه على اللوحة.
- النسب الكمية غير الصحيحة للمادة.
- استخدام أطباق غير نظيفة بشكل كافٍ أوالصفائح التي تتلامس مع الدم (يجب جمع كل مصل بواسطة ماصة منفصلة ، والتي يجب غسلها بمحلول من كلوريد الصوديوم (بتركيز 0.9٪)).
- سجل غير صحيح للمواد التي تم تحليلها.
- عدم التقيد بالوقت المطلوببداية التراص ، - يجب عدم التسرع وأخذ رد الفعل في الاعتبار قبل انقضاء خمس دقائق ، لأنه قد يكون هناك جينات ضعيفة في الدم. كما أن التعرض المفرط لا يستحق كل هذا العناء ، لأن القطرات يمكن أن تجف من الحواف وتؤدي إلى نتيجة خاطئة. من المهم اتباع قواعد تحديد فصيلة الدم وفقًا لنظام ABO.
- يمكن أن يؤدي الطرد المركزي غير الصحيح أيضًا إلى نتائج خاطئة.
- تجاوز درجة حرارة الهواء المسموح بهيؤثر على عدم وجود تراص. لتجنب الأخطاء من هذا النوع ، تحتاج إلى استخدام مصل خاص مصمم للعمل في المناخات الحارة. من الضروري تحديد مجموعات الدم على طبق أو صفيحة ، يتم إنزال سطحها الخارجي في الماء البارد.
أخطاء بيولوجية محددة
تنقسم الأخطاء المرتبطة بالخصوصية البيولوجية للدم الذي تم تحليله إلى نوعين.
- يعتمد على خصائص كريات الدم الحمراء.
- أخطاء بسبب الخصائص البيولوجية للمصل.
دعنا نفكر في كل نوع بمزيد من التفصيل.
يعتمد على خصائص كريات الدم الحمراء
- تراص متأخر يعزى إلى "ضعيف"أشكال كريات الدم الحمراء ومستضدات. من أجل تجنب الأخطاء ، من الضروري تحديد فصيلة الدم للمتبرعين والمتلقين باستخدام كريات الدم الحمراء القياسية. تحديد agglutinogen أ2 يجب إعادة فحصه مع أنواع أخرى من الكواشف والأواني الأخرى ، مما يزيد من وقت تسجيل التفاعل.
- "التراص" ("التراص التلقائي") - مهارةيظهر الدم نفس التفاعل غير النوعي مع جميع الأمصال ، بما في ذلك دمك. بعد خمس دقائق ، تضعف شدة هذا التراص ، على الرغم من أنه يجب أن يزداد. لوحظت حالات مماثلة في مرضى السرطان ، ومرضى الحروق ، إلخ. كعنصر تحكم ، من الضروري تقييم مظهر تراص كريات الدم الحمراء التي تم تحليلها في المصل القياسي للمجموعة الرابعة والمحلول الملحي. عندما يتم تحديد فصيلة الدم "التلصيق" نتيجة للغسيل الثلاثي للكريات الحمر. إذا لم يعطِ النتيجة المرجوة ، فمن المفيد إعادة سحب عينة الدم في أنبوب تم تسخينه قبل الإجراء ووضع العينة في حاوية حرارية للمساعدة في الحفاظ على درجة حرارة 37 درجة مئوية وما فوق. ثم يجب نقله إلى المختبر حيث يتم الحفاظ على درجة الحرارة المذكورة أعلاه ويتم تسخين المحلول الملحي واللوح والكواشف.
- في بعض الأحيان خلايا الدم الحمراء في عينة الدميتم ترتيبها مثل "أعمدة العملات المعدنية" ، ويمكن الخلط بينها وبين تراص. إذا أضفت قطرتين من محلول متساوي التوتر وقمت بهز القرص بلطف ، فإن خلايا الدم الحمراء في الموضع الصحيح.
- تراص غير كامل أو مختلط يحدث في المرضى الذين يعانون من المجموعات الثانية والثالثة والرابعة نتيجة زرع نخاع العظم أو في الأشهر الثلاثة الأولى بعد نقل الدم 0 (I).
مصل بيولوجي
- أثناء الاختبار الروتيني نتيجة لذلكالتحسس السابق ، تم الكشف عن الأجسام المضادة ذات النوعية المختلفة. من الضروري تحديده واختيار كريات الدم الحمراء بدون محتوى المستضد الذي تم اكتشاف التحصين له. يجب أن يتأكد المستلم من اختيار دم متبرع متوافق بشكل فردي.
- لا توجد أجسام مضادة A و B ، والتي لوحظت في الأطفال حديثي الولادة والمرضى الذين يعانون من كبت المناعة الخلطية.
- مع تشكيل "أعمدة عملة" غير طبيعييجب تأكيد النتيجة عن طريق أخذ كريات الدم الحمراء القياسية للمجموعة الأولى. يساعد محلول كلوريد الصوديوم واهتزاز اللوحة على التمييز بين التراص الحقيقي وقضبان العملات المعدنية
أخطاء مرتبطة باستخدام الكريات الحمر المعيبة المعيبة والأمصال
الأمصال الضعيفة ذات تاريخ انتهاء الصلاحية أو التي يقل عيارها عن 1:32 قادرة على توليد تراص ضعيف ومتأخر. استخدام هذه الكواشف غير مقبول.
استخدام خلايا الدم الحمراء المعيارية غير الصالحة للاستعمالأو الأمصال المحضرة في ظروف غير معقمة والمحفوظة بشكل غير كاف ، تؤدي إلى ظهور تراص "جرثومي" ذو طبيعة غير محددة.
هناك العديد من الافتراضات الشائعة حولفصائل الدم لنظام ABO التي ظهرت فور اكتشافها في ثقافات العالم المختلفة. لذلك ، على سبيل المثال ، في الثلاثينيات من القرن الماضي في اليابان وبعض البلدان الأخرى ، اكتسبت النظرية التي تربط فصيلة الدم بنوع معين من الشخصية شعبية. نظريات مماثلة شائعة اليوم.
هناك أيضًا رأي مفاده أن الشخص المصاب بالمجموعة (أ) يكون عرضة للإصابة بمخلفات شديدة ، وأن O يرتبط بأسنان جيدة ، وأن المجموعة A2 لديها أعلى مستوى ذكاء. لكن مثل هذه الادعاءات لم يتم إثباتها علميًا.
قمنا بفحص تحديد فصائل الدم بواسطة نظام ABO باستخدام الأمصال القياسية.
